改良的碱裂解法提取动物细胞附加体DNA

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：h482649

【摘要】

：

目的利用一种快速、简便的方法提取动物细胞附加体DNA。方法通过电转移的方法介导pEGFP-N1转染小鼠成纤维细胞NIH3T3和中国仓鼠卵巢癌细胞CHO等细胞系。转染后48h，收集转染细

【作者】

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周海胜汪渊秦宜德储斌张胜权周青沈继龙

【机构】

：

安徽医科大学生物化学教研室,教育部安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室,安徽省人畜共患病重点实验室

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

质粒 DNA

【基金项目】

：

安徽医科大学博士科研基金(编号:XJ200801)

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目的利用一种快速、简便的方法提取动物细胞附加体DNA。方法通过电转移的方法介导pEGFP-N1转染小鼠成纤维细胞NIH3T3和中国仓鼠卵巢癌细胞CHO等细胞系。转染后48h，收集转染细胞。用STET缓冲液重悬细胞，加入碱裂解液裂解细胞，再用7．5mol／L醋酸胺中和。离心收集上清，用1：1酚／氯仿抽提2次，氯仿抽提1次，乙醇沉淀附加体DNA。TE溶解DNA。提取的DNA通过PCR和Southern blot方法进行分析。结果PCR和Southern blot结果证实利用改良的碱裂解法可以从动物细胞提取附加

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