抗肝癌单链抗体的活性检测

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将抗肝癌单克隆抗体 HAb25的轻、重链可变区基因通过Linker连接起来,构建成抗肝癌单链抗体scFv25,然后亚克隆入含 E-tag检测标签的 pET15b表达载体进行融合表达。表达产物(scFv25-E-tag)采用 SABC法对肝癌细胞涂片进行染色,利用鼠抗E-tag抗体间接检测初步纯化的scFv25的活性,同时采用竞争结合实验检测scFv25的亲和活性。scFv25能够与靶细胞特异性结合,阳性部位主要定位于细胞膜上;scFv25可封闭53%的亲本抗体的亲和活性。scFv25较好地保持了亲本抗体的
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