锌指蛋白A20及其突变体质粒转染对小鼠内毒素血症的预防作用

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目的 研究锌指蛋白A20(mA20)及其突变体mA20-ZnF4-7质粒转染对脂多糖(LPS)攻击所致小鼠内毒素血症的预防作用.方法 用LPS攻击小白鼠制备内毒素血症动物模型.随机分为等渗盐水对照组(NS组)、单纯LPS组(LPS组)、pCAGGS-flag组(质粒组)、pCACGS-flag-mA20预防组(mA20组)和pCAGGS-flag-mA20-ZnF4-7预防组(mA20突变体组).按10μg质粒:1.6 ml等渗盐水比例溶于等渗盐水中,采用"基于流体动力学基因转染方法"对实验小鼠进行质粒预防性注射.以ELISA检测各组血浆和组织TNF-α、IL-1β表达并观察组织病理变化.结果 (1)mA20组和mA20-突变体组的TNF-α在各时相点表达分别为:6 h:(211.942±9.133)pg/ml、(163.536±0.502)pg/ml,12 h:(195.130±26.318)pg/ml,(206.446±34.797)pg/ml,24.h:(182.963±14.527)pg/ml、(158.029±19.176)pg/ml,均显著低于LPS组和质粒组(P<0.05).(2)mA20组和mA20突变体组的IL-1β在各时间点表达分别为:6 h:(137.908.±4.487)pg/ml、(138.598±8.733)pg/ml,12 h:(137.678±3.539)pg/ml、(137.448±7.953)pg/ml,24 h:(129.862±11.602)pg/ml、(126.873±6.942)pg/ml,均显著低于LPS组和质粒组(P<0.05).(3)mA20组和mA20突变体组内各时间点之间TNF-α及IL-1β表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)病理观察结果显示,mA20组和mA20突变体组的肝、肺损伤均较LPS组和质粒组轻.结论 基于流体动调控炎症反应力学的mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒转染对实验性内毒素血症有相似的预防作用,mA20有功能丰余性,为临床应用及mA20突变体研究提供了一定的实验基础。

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