三聚氰胺人源scFv抗体筛选与鉴定

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目的筛选三聚氰胺人源单链可变区(scFv)抗体,为研究快速检测试剂盒奠定基础。方法采用噬菌体表面展示技术,分别以三聚氰胺、生物素化三聚氰胺作为包被抗原,从噬菌体抗体文库中经过3轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程,随机挑选阳性克隆,利用酶联免疫吸附法(ELIA)、交叉反应及竞争抑制实验,对比后获得与抗原结合活性较好的克隆提取质粒,亚克隆到pCANTAB5E载体,对其重组质粒进行分析。结果质粒酶切片段与目的相符。结论利用生物素化抗原筛选抗体创新了原有筛选方法,为下一步研究创造条件。
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