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根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)1143株结构蛋白VP3基因的序列,设计1对特异性引物,经PCR从原核表达载体pET—VP3中扩增出VP3基因片段,克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段。定向克隆入pcDNA3.1(+)载体,转化大肠杆菌DH5u,鉴定后大量提取质粒。转染COS-1细胞,用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB/c小鼠进行免疫。结果2次免疫后就检测到特异性抗体,表明该载体在动物体内有较高的表达水平,可用于动物体内免疫,为进一步研究AEV的核酸疫苗打