丹参酮ⅡA磺酸钠对瘢痕成纤维细胞增殖及转化生长因子β1和a平滑肌肌动蛋白mRNA及蛋白表达的影响

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目的研究丹参酮ⅡA磺酸钠(sTS)对人增生性瘢痕(HS)Fb增殖及TGF—β1与d平滑肌肌动蛋白(a—SMA)mRNA、蛋白表达的影响,探讨STS抑制搬痕的能机制。方法收集8例患者手术切除的烧伤创面愈合后HS组织进行Fb培养,取第3~6代细胞进行实验。按随机数字表法将细胞分为对照组和实验组,其中实验组又分为0.050、0.075、0.100、0.125、0.150、0.200mg/mLSTS距组,各亚组分别加入含村j应浓度的STS培养液,对照组加入等体积无血清培养液。各组培养24、48h后,于倒置相差显微镜下观察细胞形态;应用噻唑蕊法检测F11增殖情况并计算增殖抑制率。应厢赁白质印迹法检测培养48h后各组细胞TGF-β1,和a-SMA蛋白表达量,RT—PCR法检测各组TGF-β1,及a—SMAmRNA表达量(此2个指标实验组未设0.200mg/mLSTS亚组)。对数据行析凶设计疗差分析,各组间数据比较采刷LSD检验,方羞不齐时应刖Games—Howell榆验。结果(1)对照组细胞生长良好;实验组细胞出现贴壁减少,排列紊乱,细胞变小、变圆,胞内颗粒增多,细胞坏死等现象。0.200mg/mLSTS亚组可见大量细胞坏死碎片.(2)实验组各亚组对照组相比吸光度值显著降低,Fb增殖受到明照抑制(P值均小于0.01)、随着STS浓度升高和作用时间延长,增殖抑制率同步增大,表现小时间及浓度依赖效应;SFS作用24、48h,各实验亚组增殖抑制率分别为23.58%、32.11%、37.56%、57.98%、79.53%、96.69%和34.72%、38.48%、47.62%、64.40%、89.70%、98.01%。(3)实验组叶除0.050mg/mFS亚组外,其余各哑组’TGF—β1,和a-SMA蛋白表达量均较对照组明显减少(F值分别为57.674、47.795,P值均小于0.001);0,150mg/mLSTS亚组TGF—β1,和d.SMA蛋白表达墙降至最低,分别为0.34±0.06、0.33±0.07。各实验亚组TGF—β1和a—SMAmRNA相对表达量与对照组相比均明屈降低(F值分别为68.548、47.522,P值均小于0.001);0.150mg/mLSTS亚组TGF—β1.mRNA(0.39±0.07)和d.SMAmRNA表达最(0.42±0.08)下降最为显著。结论STS能抑制瘢痕增殖、减少TGF—β1和a-SMA蛋白和mRNA表达,可能有利于减轻Hs的形成和挛缩,成为治疗瘢痕的潜在药物。

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