【摘 要】
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目的:探讨没食子酸(GA)对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响讨论其作用机制。方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.05 g·L-1)组,通过细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测GA(0.02
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目(2021D01C259);
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目的:探讨没食子酸(GA)对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响讨论其作用机制。方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.05 g·L-1)组,通过细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L-1)处理HCT-116和Caco-2细胞12,24,48,72 h增殖抑制率,选取有效抑制增殖的GA浓度;结晶紫染色法检测细胞集落形成能力;划痕实验检测细胞迁移;荧光探针法(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化(p)-JAK2,STAT3,p-STAT3,Bcl-2和Bax的表达变化。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L-1)组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率升高(P<0.05,P<0.01),并呈现浓度与时间依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),呈现时间依赖效应。与空白组比较,两种细胞GA(0.1,0.15,0.2 g·L-1)组细胞集落形成数显著降低(P<0.01),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),划痕愈合率显著降低(P<0.01),细胞内ROS荧光强度显著升高(P<0.01),上清液中IL-6,TNF-α表达降低(P<0.05,P<0.01),以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01),细胞内ROS荧光强度显著升高(P<0.01),细胞上清液中IL-6,TNF-α表达降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot显示,与空白组比较,GA(0.1,0.15,0.2 g·L-1)组2种细胞内p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2表达明显降低(P<0.01),而Bax蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3,Bcl-2/Bax显著降低(P<0.01),以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组2种细胞内p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2表达降低(P<0.05,P<0.01),而Bax蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3,Bcl-2/Bax降低(P<0.05,P<0.01)。结论:GA可抑制结肠癌HCT-116和Caco-2细胞活性,其机制可能与增加细胞内ROS的积累,下调肿瘤微环境中的炎症因子IL-6,TNF-α的表达和JAK/STAT信号通路中p-JAK2,p-STAT3蛋白表达,进而下调Bcl-2,上调Bax有关。
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