【摘 要】
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目的:探讨没食子酸（GA）对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶（JAK）/信号转导与转录激活因子（STAT）信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）表达的影响讨论其作用机制。方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.05 g·L-1)组,通过细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法检测GA(0.02
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目（2021D01C259）；
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目的:探讨没食子酸（GA）对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶（JAK）/信号转导与转录激活因子（STAT）信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）表达的影响讨论其作用机制。方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.05 g·L-1)组,通过细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法检测GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L-1)处理HCT-116和Caco-2细胞12,24,48,72 h增殖抑制率,选取有效抑制增殖的GA浓度;结晶紫染色法检测细胞集落形成能力;划痕实验检测细胞迁移;荧光探针法（DCFH-DA）检测细胞活性氧（ROS）水平;酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测细胞上清液中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JAK2,磷酸化（p）-JAK2,STAT3,p-STAT3,Bcl-2和Bax的表达变化。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L-1)组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率升高（P<0.05,P<0.01）,并呈现浓度与时间依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率显著升高（P<0.01）,呈现时间依赖效应。与空白组比较,两种细胞GA(0.1,0.15,0.2 g·L-1)组细胞集落形成数显著降低（P<0.01）,细胞集落形成抑制率显著升高（P<0.01）,划痕愈合率显著降低（P<0.01）,细胞内ROS荧光强度显著升高（P<0.01）,上清液中IL-6,TNF-α表达降低（P<0.05,P<0.01）,以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组细胞划痕愈合率显著降低（P<0.01）,细胞内ROS荧光强度显著升高（P<0.01）,细胞上清液中IL-6,TNF-α表达降低（P<0.05,P<0.01）。Western blot显示,与空白组比较,GA(0.1,0.15,0.2 g·L-1)组2种细胞内p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2表达明显降低（P<0.01）,而Bax蛋白表达增加（P<0.05,P<0.01）,p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3,Bcl-2/Bax显著降低（P<0.01）,以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L-1)组2种细胞内p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2表达降低（P<0.05,P<0.01）,而Bax蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01）,p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3,Bcl-2/Bax降低（P<0.05,P<0.01）。结论:GA可抑制结肠癌HCT-116和Caco-2细胞活性,其机制可能与增加细胞内ROS的积累,下调肿瘤微环境中的炎症因子IL-6,TNF-α的表达和JAK/STAT信号通路中p-JAK2,p-STAT3蛋白表达,进而下调Bcl-2,上调Bax有关。
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