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用低温酶消化法分离人气管上皮细胞，具有细胞损伤小，活力及纯度高的优点，成纤维细胞污染低。人胎盘胶原提高了气管上皮细胞的贴壁性。无血清培养基能促进人气管上皮细胞增殖，分化和成熟。气液界面培养方式更好地模拟了气管上皮细胞的天然生长环境，细胞在膜上呈复层生长，有利于其分化成熟及功能表达。光镜下细胞形态及免疫组化角蛋白染色阳性证实培养细胞为气管上皮细胞。本文所建立的人气管上皮细胞体外气液界面无血清培养方法