【摘 要】
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植物病毒病是制约作物生产的主要病害之一.及时明确其病毒病原和发展规律是有效控制其大规模传播的前提.而现有植物病毒病检测技术存在周期长、步骤繁琐、检测环境严苛等缺点
【机 构】
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山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801
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植物病毒病是制约作物生产的主要病害之一.及时明确其病毒病原和发展规律是有效控制其大规模传播的前提.而现有植物病毒病检测技术存在周期长、步骤繁琐、检测环境严苛等缺点.本研究以烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)为模型,基于碱基互补配对原则设计针对TMV的功能化磁珠(CMBs-ACPTMV)进行RNA提取,并对功能化磁珠的制备条件、提取反应条件以及灵敏性和稳定性等性能进行优化分析.结果表明,当添加4 μmol捕获探针(ACPTMV)、0.08 mg羧基磁珠(CMBs)时,所制备的CMBs-ACPTMV吸附RNA的能力最好;当提取时间为3 min时,CMBs-ACPTMV提取RNA的效果最好,而改变CMBs-ACPTMV的提取温度时其提取能力无明显变化;性能评价分析发现,CMBs-ACPTMV的灵敏度可达2.5 ng/μL,且检测稳定性较好.与常规RNA提取技术相比,CMBs-ACPTMV在检测时间和样品消耗量上具有突出优势.本研究所建立的功能化磁珠提取法快速、安全和简便,只需简易设备便可实现植物病毒RNA的快速提取,具有广阔的应用前景.
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