【摘 要】
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本研究根据人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）与受体结合后激活cAMP信号通路，构建一种LHCGR-CRE-luc-HEK293转基因细胞系，采用荧光素酶检测系统对hCG进行生物活性检测，利用四参数拟合分析计算样品相对效价。并且对该方法条件进行优化，对方法的专属性、相对准确度、精密度和线性进行验证。结果显示，hCG浓度与报告基因表达量存在量效关系，
【基金项目】
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中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金（2022A1）；
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本研究根据人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）与受体结合后激活cAMP信号通路，构建一种LHCGR-CRE-luc-HEK293转基因细胞系，采用荧光素酶检测系统对hCG进行生物活性检测，利用四参数拟合分析计算样品相对效价。并且对该方法条件进行优化，对方法的专属性、相对准确度、精密度和线性进行验证。结果显示，hCG浓度与报告基因表达量存在量效关系，且符合四参数曲线。经优化后，条件确定为hCG初始浓度为2.5 μg·mL-1，稀释倍数为1:4，细胞数为每孔10 000～15 000 个，诱导时间为6 h。该方法具有良好的专属性，相对准确度的相对偏倚范围在-8.9%～3.4%，线性回归方程相关系数为0.996，中间精密度几何变异系数范围为3.3%～15.0%，线性范围为50%～200%。本研究成功建立并验证了一种报告基因法检测hCG生物学活性，可以用于hCG生物活性检测和质量控制。
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