链霉亲和素修饰的量子点联合生物素标记的叶酸在卵巢癌SKOV3细胞体外成像中的应用

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目的 :探讨链霉亲和素(streptavidin,SA)修饰的量子点(quantum dots,QDs)联合生物素标记的叶酸(folic acid,FA)在卵巢癌SKOV3细胞体外成像中的应用价值。方法 :采用活泼酯法合成SA-QDs复合物,并用同样的方法以聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)树状分子为载体合成生物素化FA-PAMAM。采用生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs荧光探针标记叶酸受体(folate receptor,FR)高表达的SKOV3细胞,同时以采用游离FA预处理的SKOV3细胞和FR低表达的肺腺癌A549细胞为对照,验证该荧光探针靶向SKOV3细胞的特异性。随后,以未用PAMAM为载体[生物素化FA-聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)联合SA-QDs荧光探针]或无生物素-链霉亲和素放大系统的荧光探针(FA-PAMAM-QDs)为对照,验证该探针的荧光信号双重放大效应。结果 :FR高表达的SKOV3细胞可被生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs的荧光探针特异性识别,平均荧光强度高达114.92±2.87,显著高于FA预处理后再用该探针进行检测的SKOV3细胞(57.86±7.59)和FR低表达的肺腺癌A549细胞(14.94±0.83)(P值均<0.000 1)。在双重放大效应的验证实验中,生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs荧光探针标记的SKOV3细胞的平均荧光强度为120.89±3.80,其荧光强度明显高于生物素化FA-PEG联合SA-QDs荧光探针标记的SKOV3细胞的77.50±2.43和FA-PAMAMQDs荧光探针标记的SKOV3细胞的47.81±1.35(P值均<0.000 1)。结论 :构建获得了一种特异性靶向卵巢癌SKOV3细胞的生物素化FAPAMAM联合SA-QDs荧光探针,该探针在卵巢癌早期诊断方面具有潜在应用价值。
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