【摘 要】
：
【背景】醇脱氢酶AdhS能催化不对称还原反应制备（R）-2-氯-1-苯乙醇，但由于自身再生辅酶NADH的能力不足，需要辅酶再生酶协助其再生NADH。谷氨酸脱氢酶能以谷氨酸为底物，再生辅酶NAD（P）H，具有辅酶再生酶的潜力。【目的】克隆表达谷氨酸脱氢酶基因gdhA，构建谷氨酸脱氢酶GdhA与醇脱氢酶AdhS的大肠杆菌共表达体系，提高AdhS制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率。【方法】从枯草芽
【基金项目】
：
国家自然科学基金（81603254）； 浙江省博士后科研项目择优资助项目（BSH1502156）；
论文部分内容阅读
【背景】醇脱氢酶AdhS能催化不对称还原反应制备（R）-2-氯-1-苯乙醇，但由于自身再生辅酶NADH的能力不足，需要辅酶再生酶协助其再生NADH。谷氨酸脱氢酶能以谷氨酸为底物，再生辅酶NAD（P）H，具有辅酶再生酶的潜力。【目的】克隆表达谷氨酸脱氢酶基因gdhA，构建谷氨酸脱氢酶GdhA与醇脱氢酶AdhS的大肠杆菌共表达体系，提高AdhS制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率。【方法】从枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） 168中克隆基因gdhA，并在大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3）中表达，分析辅酶再生活力；再与醇脱氢酶AdhS共表达，优化表达条件；分析不同辅酶再生方案对制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率的影响。【结果】谷氨酸脱氢酶GdhA再生NADH的比活力为694 U/g；经GdhA与AdhS的共表达及表达条件优化后，制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率达465 U/L；经比较，GdhA协助再生辅酶NADH，可使AdhS制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率提高至约3倍。【结论】谷氨酸脱氢酶GdhA为NADH高效再生酶，与醇脱氢酶AdhS共表达可显著提高AdhS制备（R）-2-氯-1-苯乙醇的转化效率。
其他文献
＆lt;正＆gt;近期,染料行业迎来了一波"涨价潮"。青岛海湾精细化工有限公司（以下简称"海湾精化"）、浙江龙盛集团股份有限公司（以下简称"浙江龙盛"）、浙江闰土股份有限公司（以下简称"闰土股份"）陆续发布产品涨价通知,涉及全系分散染料,价格涨幅在10%左右。此轮染料产品涨价的原因是什么?价格会继续攀升吗?还会持续多久?染料企业宣布涨价在此轮"涨价潮"中,率先发出涨价函的是海湾精化。8月23日,该
目的:分析2010～2019年国家自然科学基金对白内障研究的资助情况，探讨近期白内障基础研究的发展重点，为白内障领域科研人员了解专业基础研究的进展和申请资助提供参考信息。方法:统计2010～2019年国家自然科学基金对白内障领域研究的资助项目，对获得资助的项目类别、项目名称、经费数额、申请单位和地区、批准年度及关键词等进行统计和分析。结果:近十年来，白内障研究的项目数及受助金额分别占眼科学总数的9
本文从传统统计数据收集方法的优缺点出发,分析在信息数据大爆炸的大数据时代,统计部门和统计人员应对传统的数据收集方法做出改变,以建立适应大数据时代数据挖掘、分析、应用的方法体系,进一步提升统计服务职能。
目的 探讨年龄相关性白内障不同时期超声乳化手术效果。方法 按照白内障核分级标准将选取的白内障患者分为早期（ES）组：均为Ⅱ～Ⅲ级核白内障患者，共76例（92眼）;晚期（LP）组：均为Ⅳ～Ⅴ级核白内障，共74例（90眼）。分析ES组和LP组的视力情况、眼压改善情况、泪液分泌试验（SIt）和泪膜破裂时间（BUT）指标、手术并发症的差异性。结果 ES组视力好转情况明显比LP组优（P＆lt;0.05）。E
＆lt;正＆gt;数学概念是学生学习数学的基础，是判断和推理的起点，也是培养数学能力、发展数学思维的基础。问题是学习的开端，如何设计恰当、合理、有效的问题，引领学生围绕问题展开概念的探究活动，是优化小学数学概念教学的研究方向。本文以小学数学人教版三年级上册《倍的认识》的教学为例，来谈谈认识和体会。
＆lt;正＆gt;白内障是指晶状体透明度降低或者颜色改变所导致的光学质量下降的退行性改变。各种原因如老化、遗传、局部营养障碍、免疫与代谢异常，以及外伤、中毒、辐射等，都能引起晶状体代谢紊乱，导致晶状体蛋白质变性而发生混浊，引起白内障。想要预防白内障，笔者建议可常吃以下几种食物：黑芝麻其不仅含有丰富的脂肪和蛋白质，还含有糖类、
＆lt;正＆gt;肠息肉是指一类从黏膜表面突出到肠腔内的隆起状病变,在没有确定病理性质前统称为息肉。肠息肉常见于40岁以上的男性,临床可有便血、腹泻、腹痛等无特异性的临床表现,绝大部分是在内镜检查中偶然发现的。肠息肉的病因尚未明确,但研究表明息肉的发生与幽门螺旋杆菌感染、长期应用质子泵抑制剂、胆汁反流、基因遗传、环境、吸烟、饮食习惯等相关,并提示肠息肉的发生与生活方式、饮食习惯具有很大关系[1-2
＆lt;正＆gt;肝硬化患者出血和血栓形成的预防及管理是临床难题。本部实践指南[1]针对肝脏疾病止血状态的当前观点、接受有创操作的患者纠正血小板减少症和凝血系统异常的需求、伴有止血异常的住院患者预防血栓的需求等争议性问题提供了实践指导。虽然一些干预措施已广泛用于临床实践，但专家组制定推荐意见时认为它们并无价值。另外，本部实践指南的多项声明并未被设计良好的临床研究得出的明确证据所支持。