鸭肠炎病毒ul47基因的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fyishen

【摘要】

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提取鸭肠炎病毒（DEV）基因组DNA，采用PCR方法扩增获得了DEV ul47基因，将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a，构建重组质粒pET-30a—ul47，并转化受体菌Rosetta（DE3）pLysS中，经IPTG

【作者】

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张杨刘峰源乌伊罕刘晓玫王君伟马波

【机构】

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东北农业大学动物医学院

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2008年11期

【关键词】

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鸭肠炎病毒 ul47基因原核表达间接免疫荧光试验蚀斑减数中和试验 duck enteritis virus ul47 gene prokaryotic

【基金项目】

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国家“十一五”科技支撑计划项目（2006BAD06A05-1）

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提取鸭肠炎病毒（DEV）基因组DNA，采用PCR方法扩增获得了DEV ul47基因，将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a，构建重组质粒pET-30a—ul47，并转化受体菌Rosetta（DE3）pLysS中，经IPTG诱导表达，表达产物用SDS-PAGE分析。结果显示，ul47基因在大肠杆菌Rosetta中获得与预期大小相符的表达蛋白。利用Ni—NTA纯化表达蛋白，制备了免抗DEVU L47蛋白的多克隆抗体，经琼脂双扩散测定，该抗血清效价为1：16。间接免疫荧光试验和蚀斑减数中和试验结果显示

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