【摘 要】
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目的 探讨积雪草苷(Ass)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及作用机制.方法 不同浓度的Ass作用IL-1β诱导软骨细胞24 h,流式细胞仪检测细胞凋亡,酶联免疫吸附
【机 构】
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郴州市第一人民医院南院急诊科,郴州423000
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目的 探讨积雪草苷(Ass)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及作用机制.方法 不同浓度的Ass作用IL-1β诱导软骨细胞24 h,流式细胞仪检测细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-342-5p和水通道蛋白3(AQP3) mRNA表达水平,Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和AQP3蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-342-5p与AQP3靶向关系.转染miR-342-5p抑制剂或AQP3过表达载体至软骨细胞,上述相同方法检测抑制miR-342-5p表达或AQP3过表达对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及IL-6和TNF-α表达的影响.结果 Ass可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡率、Bax蛋白、IL-6和TNF-α表达及miR-342-5p表达(P＜0.05),促进Bcl-2蛋白、AQP3 mRNA和蛋白表达(P＜0.05).miR-342-5p在软骨细胞中负调控AQP3表达.抑制miR-342-5p或AQP3过表达后,IL-1β诱导的软骨细胞凋亡率、Bax蛋白、IL-6和TNF-α表达降低(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.05).抑制AQP3表达逆转了抑制miR-342-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、Bax和Bcl-2蛋白及IL-6和TNF-α表达的影响.结论 Ass可抑制IL-1β诱导软骨细胞凋亡和炎症反应,其可能通过调控miR-342-5p/AQP3保护软骨细胞损伤.
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