【摘 要】
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目的:构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库,并从中筛选出阳性克隆.方法:用五步蛇毒素免疫BALB/C小鼠,挑选其中效价最高的3只小鼠提取脾脏组织,抽提细胞总RNA,经RT-PCR
【机 构】
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成都军区联勤部军事医学研究所,云南大学生化学院生物技术系生化室
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目的:构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库,并从中筛选出阳性克隆.方法:用五步蛇毒素免疫BALB/C小鼠,挑选其中效价最高的3只小鼠提取脾脏组织,抽提细胞总RNA,经RT-PCR分别扩增出VH、VL基因片段,经Linker连接成ScFv基因(single chain variable fragment),再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体,转化至大肠杆菌TG1中表达,经辅助噬菌体(Helper phage)M13K07拯救后建成噬菌体显示文库.结果:经4轮吸附-洗脱-富集筛选后,库容量
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