羰基还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达及其在不对称还原产麻黄碱中的初步应用

来源 :工业微生物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kebo824

【摘要】

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通过羰基还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达，解决羰基还原酶在催化底物过程中的辅酶再生的问题。以枯草芽孢杆菌基因组为模板，采用PCR的手段扩增得到葡萄糖脱

【作者】

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宇文伟刚张梁王正祥石贵阳

【机构】

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工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心

【出处】

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工业微生物

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

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羰基还原酶葡萄糖脱氢酶辅酶再生共表达 d-伪麻黄碱全细胞转化 carbonyl reductase glucose dehydrogenase co

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30770054）,国家高技术研究发展计划（863计划）资助项目（2007AA100402）.

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通过羰基还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达，解决羰基还原酶在催化底物过程中的辅酶再生的问题。以枯草芽孢杆菌基因组为模板，采用PCR的手段扩增得到葡萄糖脱氢酶基因gdh与已构建好的pKK223—3-mldh连接，转化E．coliJM109获得重组菌E-colipKK223—3-gdh—mldh。SDS-PAGE结果表明羰基还原酶及葡萄糖脱氢酶均有表达其相对分子质量分别为43kD和31kD。液相检测重组菌细胞破碎液在不添加外源的葡萄糖脱氢酶的情况下能专一性转化1-苯基-2-甲氨基丙酮简称MAK为

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