正北芪中一种免疫活性蛋白质提取工艺的优选

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目的:优选正北芪中一种免疫活性蛋白Am PR10-16(16.0 k Da)的提取工艺。方法:以正北芪中Am PR10-16的可溶性蛋白二级结构的圆二色性考察提取温度,在单因素试验基础上,以Am PR10-16在SDS-PAGE胶图中的蛋白条带吸光度(峰面积)为指标,采用L9(34)正交试验考察提取温度、料液比、提取时间、提取溶剂、粒度、提取次数对Am PR10-16提取工艺的影响,辅以BCA法测定可溶性蛋白含量作为佐证。结果:Am PR10-16最佳提取工艺为药材粉末过4号筛,加16倍量p H 8.0的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)于40℃常压水浴提取60 min,每10 min搅拌1次。Am PR10-16提取率0.063 g·g-1。结论:优化的提取工艺能正确反映Am PR10-16提取率的最高相对量,为Am PR10-16的进一步研究提供了稳定、合理、可行的提取工艺。
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