【摘 要】
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目的 初探ClpXP蛋白复合物是否会对沙门氏菌囊泡(Salmonella-containing vacuole,SCV)结构稳定性产生影响.方法 (1)将表达绿色荧光蛋白的质粒(pGEX-6P-l-sf-GFP)通过电转化方
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院,四川成都610041
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目的 初探ClpXP蛋白复合物是否会对沙门氏菌囊泡(Salmonella-containing vacuole,SCV)结构稳定性产生影响.方法 (1)将表达绿色荧光蛋白的质粒(pGEX-6P-l-sf-GFP)通过电转化方式导人野生型鼠伤寒沙门氏菌TT-l(Wild-type)及敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-16(△clpPTT-1),分别获得表达绿色荧光蛋白的野生型鼠伤寒沙门氏菌TT-84(pGEX-6P-1-sf-GFP TT-1)和敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-85(△clpP pGEX-6P-1-sf-GFPTT-1);(2)将构建好的菌株以100:1的感染复数感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,于感染后2h和6 h收集细胞进行免疫荧光染色,采用激光共聚焦显微镜观察并计数SCV内部和外部的细菌数量,计算逃逸率.结果 感染2h和6h后,敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-85(△clpPpGEX-6P-1-sf-GFPTT-1),其SCV逃逸率显著高于野生型鼠伤寒沙门氏菌.结论 ClpXP蛋白复合物对SCV的结构稳定性具有显著影响.
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