柯萨奇病毒B3诱导大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白及I型胶原的表达情况

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目的 检测柯萨奇病毒B3(CVB3)对大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白(OPN)及I型胶原表达的影响,探讨OPN在病毒性心肌炎的可能发病机制。方法用重复感染率(MOI)为0.5PFU/cell的CVB3感染体外培养的大鼠心肌成纤维细胞,细胞分对照组(12h)、病毒组(感染后12h、1d,2d及3d)。用RT·PCR及WesternBlot、免疫组化检测OPN及I型胶原表达,并将OPN表达与I型胶原表达进行直线相关分析。结果(1)RT-PCR测得对照组12h、病毒组12h、1d、2d及3d5组OPN/13-actin吸光度比值分别为:0.38±0.06、0.56±0.06、0.72±0.05、0.98±0.06、0.86±0.02;WesternBlot测得上述5组的OPN/13-actin灰度值分别为:0.26±0.03、0.36±0.03、0.52±0.04、0.76±0.05、0.62±0.02;感染后12h,OPN表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,OPN/13-actin吸光度比值、灰度值比较差异均有统计学意义(F值分别为74.965、53.004,P均〈0.05);(2)RT-PCR测得心肌成纤维细胞对照组12h、病毒组12h、1d、2d、3dI型胶原/13-actin吸光度比值分别为:1.12±0.03、1.184-0.01、r.22±0.02、1.33±0.02、1.28±0.03,感染后12hI型胶原表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,差异有统计学意义(F=38.241,P〈0.05);(3)OPN表达与I型胶原有正相关关系(r=0.948,P〈0.001)。结论CVB3可诱导心肌成纤维细胞I型胶原及OPN表达,OPN表达与I型胶原表达呈正相关,提示OPN可能促进心肌成纤维细胞I型胶原表达,参与病毒性心肌炎心肌纤维化的发病机制。

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