【摘 要】
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目的:研制鼠抗人FL 单克隆抗体(mAb)以及对其生物学特性的研究.方法:以人FL基因转染细胞株L929-FL为免疫原,采用B细胞杂交瘤技术,获取分泌抗人FL mAb的杂交瘤细胞株.快速定性
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目的:研制鼠抗人FL 单克隆抗体(mAb)以及对其生物学特性的研究.方法:以人FL基因转染细胞株L929-FL为免疫原,采用B细胞杂交瘤技术,获取分泌抗人FL mAb的杂交瘤细胞株.快速定性试纸法鉴定mAb亚类,体内诱生腹水法制备mAb,免疫亲和层析法纯化mAb,MTT法检测mAb对白血病细胞株U937和HL-60生长的影响,Annexin V/PI染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡.结果:建立了3株稳定分泌抗人FL mAb的杂交瘤,命名为3C2、3C6和8D10.快速定性试纸法鉴定3株mAb均属小鼠lgG2a亚类.3株mAb分别识别白血病细胞U937和HL-60上表达的FL分子.将3株mAb分别加入共表达FL/Flt3的U937和HL-60细胞的培养体系中,MTT法检测显示,3C2、3C6和8D10对白血病细胞的生长均具有抑制作用(P＜0.05).Annexin V/PI染色FCM检测细胞凋亡,3C2和8D10均能增加白血病细胞凋亡的作用.结论:3C2、3C6和8D10是3株功能性抗FL mAb,对于研究FL/Flt3在白血病发生、发展中的作用具有潜在的应用价值.
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