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【摘 要】目的：及时发现人群中霍乱病例和被霍乱污染的水体及食物，尽早采取预防控制措施，防止疫情扩散。方法：采取全市常规监测和疫点监测相结合的方法。结果：常德市2009-2013年共发生3起霍乱疫情；常规外环境监测样品21349份，检出霍乱弧菌阳性78份，均为海产品；疫点检测 3份，检出带菌者1例；来自病人、带菌者、甲鱼中分离的O139群霍乱弧菌高度同源。结论：甲鱼等水产品是常德市发生霍乱的主要因素，因此应加强水产品的监测和卫生管理，同时要做好农村聚餐的卫生指导。
【关键词】霍乱；监测；水产品
【中图分类号】R516 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4231-02
【Abstract】Objective：To promptly find the cases of cholera in crowd，the food and water body contami nated by Vibriocholerae，and to take effective preventive measures as early as possible to avoid the growing epidemic. Methods：Both the regular monitoring and spots surveillance were taken. Results：Totally 3 outbreaks were reported from 2009 to 2013.21349 samples from environment were tested by regular monitoring.78 sanples were positive，which all came from the seafood. 3 samples were tested in the epidemic spots，and 1 carrier were found.The Vibrio cholera O139 strains isolated from soft-shelled turtles enjoyed a high homology with those of both patients and carriers. Conclusions：Thecontaminated sea food such as contaminated soft-shelled turtles was the main factor of the cholera O139 epidemic in Changde City.We should strengthen the monitoring of sea food and its hygiene management，and give good guidance for rural gathering-dinner.
【Key words】Cholera； Monitoring； Sea food
霍乱（ C hol e r a） 是一种古老的传染病， 在历史上曾引起 7 次大流行， 以发病急、 传播快、 波及范围广为特征， 是《 中华人民共和国传染病防治法》 规定的甲类传染病之一 ，也是国际检疫传染病中的一种。霍乱主要是由于进食受霍乱弧菌污染的水或食物所引起。开展霍乱监测，可及时发现人群中霍乱病例和被污染的水体及食物，尽早采取预防控制措施，防止疫情发生和扩散。常德市每年均在开展霍乱监测工作，现将2009—2013年霍乱监测结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 监测对象
1.1.1 腹泻病人监测 全市各级各类医疗机构，在霍乱流行季节开放腹泻门诊，按要求对所有腹泻病人进行专册登记，对具有一定临床或流行病学指征的腹泻病人采集粪便或呕吐物等标本进行病原检测，发现疑似病例，立即报告辖区内疾病预防控制机构。
1.1.2 外环境及食品监测 全市疾病预防控制中心在霍乱流行季节（5-10月），开展环境水体和食品的监测。环境水体包括淡水养殖场、水产品码头、医院污水排放口、与人群生活关系密切的河流、池塘、湖泊、水井及乡镇自来水厂水源水等，食品监测的重点为市售水产品（如鱼、虾、甲鱼、牛蛙等）以及生冷、卤制食品等。
1.1.3 疫点监测 发生霍乱疫情后对病人的密切接触者或与病人有共同暴露史的人群采集粪便或肛拭子进行霍乱弧菌检测，发现带菌者及时进行处理；对与病人发病密切相关的水、食物进行监测，查找感染来源；对可能被病人呕吐物、排泄物污染的周围环境进行监测，以便及时消毒并评价消毒效果。
1.2 监测方法 按《全国霍乱监测方案》和GB15984-1995 《霍乱诊断标准和处理原则》及《霍乱防治手册》（第5版）的规定进行采样、送检、检验和鉴定。对所有分离到的霍乱弧菌开展霍乱弧菌毒素基因检测，并送湖南省疾控中心，采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术，对收集到的霍乱弧菌进行分子生物学检测，分析来自病例的菌株与来自外环境菌株的同源性。
1.3 检测试剂 碱性蛋白胨水、庆大霉素培养基、营养琼脂均为青岛海博生物技术有限公司产品；胶体金快速检测试剂盒为北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司产品；霍乱弧菌诊断血清为宁波天润生物药业有限公司产品；生化鉴定管为宁波天润生物药业有限公司产品；霍乱弧菌实时荧光PCR检测试剂为上海之江生物科技有限公司产品；琼脂糖为Cambraex Bio Science Rockland产品；限制性内切酶Not I 为大连宝生物工程有限公司产品；蛋白酶K为MERCK公司生产。以上试剂均在有效期内使用。
1.4主要仪器 隔水式恒温培养箱；7300型荧光定量PCR仪；Bio Rad CHEF Mapper XA脉冲场凝胶电泳仪；Viber Lourmat凝胶成像仪。 3 讨论
3.1 常德市2009-2013年霍乱监测结果提示，我市霍乱疫情的发生主要跟食用被霍乱弧菌污染的水产品有关，依据如下：（1）2009-2013年常规外环境及食品霍乱弧菌监测结果显示，所有水体样和除水产品外的食品样均未检出霍乱弧菌，而水产品样检出阳性78份，阳性率为0.90%；（2）3起霍乱疫情均与聚餐有关，且聚餐食品中均有水产品；湖南省2002-2009年霍乱检测结果报告，衡阳市2003、2005年霍乱疫情及邵东县2007年霍乱疫情的详细流行病学分析报告，永兴县一起农村聚餐引起的霍乱疫情说明了这点[1-5]。（3）对来自病人和甲鱼的O139群菌株进行检测，各菌株的PFGE电泳图谱相同，高度同源。外省也有由带菌甲鱼引起的霍乱疫情报告[6]。因此，加强对海水产品的监测，提倡正确的水产品加工食用方法，对农村聚餐加强卫生指导和管理，是常德市当前预防控制霍乱疫情的工作重点。
3.2 常德市2009-2013年共检测水产品样8643份，阳性78份，阳性率0.90%，甲鱼是农村聚餐中经常使用的水产品，其在传播霍乱方面的流行病学意义应引起高度重视，常规监测中应将甲鱼作为重点监测对象，发现阳性样品及时处理。甲鱼，牛蛙等食品与我们日常饮食息息相关，为预防霍乱病例的发生，我们应追溯其污染源及污染环节，加大对海、水产品的监督管理和控制，加强市场准入制度 ， 同时加强对腹泻病人的主动监测力度。
3.3 霍乱弧菌产毒株易引起霍乱暴发疫情，而非产毒株一般只引起散发疫情。霍乱肠毒素 （ C T ） 是霍乱病原体的主要致病因子。可以使人出现剧烈的腹泻和呕吐[7]。产生 C T毒素的菌株，一般为流行株，其致病力强 ，具有引起流行性疾病的可能[8]。常德市2009-2013年检测O1群霍乱弧菌17株，未发现产毒株；检测O139群霍乱弧菌49株，产毒株39株，占79.59%，O139群霍乱弧菌的产毒株比例明显高于O1群霍乱弧菌，这应是近几年常德市霍乱疫情全部为O139群霍乱的原因之一。因此，开展霍乱弧菌毒素基因检测，了解产毒株的比例及变化趋势，对预测霍乱流行菌株及流行趋势有重要意义。
参考文献
[1] 邓志红，胡世雄，高立冬，等。湖南省2002-2009年霍乱检测结果报告[J].实用预防医学，2010，17（5）：856-858.
[2] 胡世雄，段丽琼，李俊华，等。2003年湖南省衡阳市O139群霍乱疫情流行病学调查[J].中国热带医学，2004，4（6）：942-944.
[3] 曾亚雄，谢建民，邱仁祖，等。2005年衡阳市霍乱疫情流行病学调查分析[J]。实用预防医学，2007，14（4）：1083-1084.
[4] 肖善良，罗燕，周少锋，等。2007年邵东县一起霍乱暴发疫情的流行病学分析[J]。实用预防医学，2008，15（2）：403-404.
[5] 付敏，何德彪，何孝勤，等。一起农村聚餐引起的霍乱疫情调查处理分析[J]。实用预防医学，2006，13（6）：1539-1540.
[6] 朱清。由带菌甲鱼污染食物引起的霍乱暴发调查处理报告[J]。中国当代医药，2008，15（3）：94-95.
[7] 卫生部疾病控制司。霍乱防治手册[M].1999.
[8] 严寒秋，黄芳，曲梅，等。两种P CR方法检测霍乱肠毒素的结果分析[ J ]。中国卫生检验杂志，2009，18（9）：2037-2038.
作者简介：
谢敏（1977-），女，大学本科，主管技师，主要从事微生物检验工作。
【关键词】霍乱；监测；水产品
【中图分类号】R516 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4231-02
【Abstract】Objective：To promptly find the cases of cholera in crowd，the food and water body contami nated by Vibriocholerae，and to take effective preventive measures as early as possible to avoid the growing epidemic. Methods：Both the regular monitoring and spots surveillance were taken. Results：Totally 3 outbreaks were reported from 2009 to 2013.21349 samples from environment were tested by regular monitoring.78 sanples were positive，which all came from the seafood. 3 samples were tested in the epidemic spots，and 1 carrier were found.The Vibrio cholera O139 strains isolated from soft-shelled turtles enjoyed a high homology with those of both patients and carriers. Conclusions：Thecontaminated sea food such as contaminated soft-shelled turtles was the main factor of the cholera O139 epidemic in Changde City.We should strengthen the monitoring of sea food and its hygiene management，and give good guidance for rural gathering-dinner.
【Key words】Cholera； Monitoring； Sea food
霍乱（ C hol e r a） 是一种古老的传染病， 在历史上曾引起 7 次大流行， 以发病急、 传播快、 波及范围广为特征， 是《 中华人民共和国传染病防治法》 规定的甲类传染病之一 ，也是国际检疫传染病中的一种。霍乱主要是由于进食受霍乱弧菌污染的水或食物所引起。开展霍乱监测，可及时发现人群中霍乱病例和被污染的水体及食物，尽早采取预防控制措施，防止疫情发生和扩散。常德市每年均在开展霍乱监测工作，现将2009—2013年霍乱监测结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 监测对象
1.1.1 腹泻病人监测 全市各级各类医疗机构，在霍乱流行季节开放腹泻门诊，按要求对所有腹泻病人进行专册登记，对具有一定临床或流行病学指征的腹泻病人采集粪便或呕吐物等标本进行病原检测，发现疑似病例，立即报告辖区内疾病预防控制机构。
1.1.2 外环境及食品监测 全市疾病预防控制中心在霍乱流行季节（5-10月），开展环境水体和食品的监测。环境水体包括淡水养殖场、水产品码头、医院污水排放口、与人群生活关系密切的河流、池塘、湖泊、水井及乡镇自来水厂水源水等，食品监测的重点为市售水产品（如鱼、虾、甲鱼、牛蛙等）以及生冷、卤制食品等。
1.1.3 疫点监测 发生霍乱疫情后对病人的密切接触者或与病人有共同暴露史的人群采集粪便或肛拭子进行霍乱弧菌检测，发现带菌者及时进行处理；对与病人发病密切相关的水、食物进行监测，查找感染来源；对可能被病人呕吐物、排泄物污染的周围环境进行监测，以便及时消毒并评价消毒效果。
1.2 监测方法 按《全国霍乱监测方案》和GB15984-1995 《霍乱诊断标准和处理原则》及《霍乱防治手册》（第5版）的规定进行采样、送检、检验和鉴定。对所有分离到的霍乱弧菌开展霍乱弧菌毒素基因检测，并送湖南省疾控中心，采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术，对收集到的霍乱弧菌进行分子生物学检测，分析来自病例的菌株与来自外环境菌株的同源性。
1.3 检测试剂 碱性蛋白胨水、庆大霉素培养基、营养琼脂均为青岛海博生物技术有限公司产品；胶体金快速检测试剂盒为北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司产品；霍乱弧菌诊断血清为宁波天润生物药业有限公司产品；生化鉴定管为宁波天润生物药业有限公司产品；霍乱弧菌实时荧光PCR检测试剂为上海之江生物科技有限公司产品；琼脂糖为Cambraex Bio Science Rockland产品；限制性内切酶Not I 为大连宝生物工程有限公司产品；蛋白酶K为MERCK公司生产。以上试剂均在有效期内使用。
1.4主要仪器 隔水式恒温培养箱；7300型荧光定量PCR仪；Bio Rad CHEF Mapper XA脉冲场凝胶电泳仪；Viber Lourmat凝胶成像仪。 3 讨论
3.1 常德市2009-2013年霍乱监测结果提示，我市霍乱疫情的发生主要跟食用被霍乱弧菌污染的水产品有关，依据如下：（1）2009-2013年常规外环境及食品霍乱弧菌监测结果显示，所有水体样和除水产品外的食品样均未检出霍乱弧菌，而水产品样检出阳性78份，阳性率为0.90%；（2）3起霍乱疫情均与聚餐有关，且聚餐食品中均有水产品；湖南省2002-2009年霍乱检测结果报告，衡阳市2003、2005年霍乱疫情及邵东县2007年霍乱疫情的详细流行病学分析报告，永兴县一起农村聚餐引起的霍乱疫情说明了这点[1-5]。（3）对来自病人和甲鱼的O139群菌株进行检测，各菌株的PFGE电泳图谱相同，高度同源。外省也有由带菌甲鱼引起的霍乱疫情报告[6]。因此，加强对海水产品的监测，提倡正确的水产品加工食用方法，对农村聚餐加强卫生指导和管理，是常德市当前预防控制霍乱疫情的工作重点。
3.2 常德市2009-2013年共检测水产品样8643份，阳性78份，阳性率0.90%，甲鱼是农村聚餐中经常使用的水产品，其在传播霍乱方面的流行病学意义应引起高度重视，常规监测中应将甲鱼作为重点监测对象，发现阳性样品及时处理。甲鱼，牛蛙等食品与我们日常饮食息息相关，为预防霍乱病例的发生，我们应追溯其污染源及污染环节，加大对海、水产品的监督管理和控制，加强市场准入制度 ， 同时加强对腹泻病人的主动监测力度。
3.3 霍乱弧菌产毒株易引起霍乱暴发疫情，而非产毒株一般只引起散发疫情。霍乱肠毒素 （ C T ） 是霍乱病原体的主要致病因子。可以使人出现剧烈的腹泻和呕吐[7]。产生 C T毒素的菌株，一般为流行株，其致病力强 ，具有引起流行性疾病的可能[8]。常德市2009-2013年检测O1群霍乱弧菌17株，未发现产毒株；检测O139群霍乱弧菌49株，产毒株39株，占79.59%，O139群霍乱弧菌的产毒株比例明显高于O1群霍乱弧菌，这应是近几年常德市霍乱疫情全部为O139群霍乱的原因之一。因此，开展霍乱弧菌毒素基因检测，了解产毒株的比例及变化趋势，对预测霍乱流行菌株及流行趋势有重要意义。
参考文献
[1] 邓志红，胡世雄，高立冬，等。湖南省2002-2009年霍乱检测结果报告[J].实用预防医学，2010，17（5）：856-858.
[2] 胡世雄，段丽琼，李俊华，等。2003年湖南省衡阳市O139群霍乱疫情流行病学调查[J].中国热带医学，2004，4（6）：942-944.
[3] 曾亚雄，谢建民，邱仁祖，等。2005年衡阳市霍乱疫情流行病学调查分析[J]。实用预防医学，2007，14（4）：1083-1084.
[4] 肖善良，罗燕，周少锋，等。2007年邵东县一起霍乱暴发疫情的流行病学分析[J]。实用预防医学，2008，15（2）：403-404.
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[6] 朱清。由带菌甲鱼污染食物引起的霍乱暴发调查处理报告[J]。中国当代医药，2008，15（3）：94-95.
[7] 卫生部疾病控制司。霍乱防治手册[M].1999.
[8] 严寒秋，黄芳，曲梅，等。两种P CR方法检测霍乱肠毒素的结果分析[ J ]。中国卫生检验杂志，2009，18（9）：2037-2038.
作者简介：
谢敏（1977-），女，大学本科，主管技师，主要从事微生物检验工作。