【摘 要】
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目的研究Toll样受体4(TLR4)在铜绿假单胞菌(Pseudomonase aeruginosa,PA)上清液诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7凋亡中的作用。方法 RAW264.7巨噬细胞分为control组(不做任何处
【机 构】
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锦州医科大学附属第一医院呼吸内科;
【基金项目】
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辽宁省自然科学基金(20170540390);2017锦州医科大学大学生创新创业项目(201710160000023)
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目的研究Toll样受体4(TLR4)在铜绿假单胞菌(Pseudomonase aeruginosa,PA)上清液诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7凋亡中的作用。方法 RAW264.7巨噬细胞分为control组(不做任何处理)、MOD组(体积分数为0.10、0.20、0.30的PA上清液处理)、control+TAK-242组(TLR4阻断剂处理)、MOD+TAK-242组(体积分数为0.10、0.20、0.30的PA上清液处理+TLR4阻断剂处理),采用Hoechst染色法观察细胞凋亡后细胞核形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测TLR4蛋白的表达。结果与control组相比,MOD组呈现不同程度的细胞凋亡(P<0.05),且随着PA上清液体积分数的逐渐增加,细胞凋亡率不同程度逐渐增加(P<0.05);加入TLR4阻断剂后,细胞凋亡率比MOD组明显降低(P<0.05)。同时随着PA上清液体积分数逐渐增加,TLR4蛋白的表达不同程度逐渐增加(P<0.05);加入TLR4阻断剂后,TLR4蛋白的表达水平降低(P<0.05)。结论 PA上清液可以诱导TLR4表达,同时促进巨噬细胞的凋亡。然而加入TLR4阻断剂能够明显抑制TLR4的表达和巨噬细胞凋亡,可见TLR4在PA上清液诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡中具有促进作用。
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