高碘对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠甲状腺线粒体超氧化物牛成的影响

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bn1984
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目的 观察高碘对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除(MT-Ⅰ/ⅡKO)小鼠甲状腺线粒体超氧化物生成的影响。方法利用6-8周龄健康雄性MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠和同源对照(WT)小鼠的甲状腺组织,制备甲状腺细胞悬液,分别用10-4、10-3、10-2mol/L碘化钾(KI)和10-3mol/L过氧化氢(H2O2)处理2h,并以无KI或H2O2处理作为对照。利用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞活力,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量.利用MitoSOX探针通过流式细胞术检测甲状腺细胞线粒体超氧化物生成。结果与对照组[(100.00±0.00)%、(100.00±0.00)%]比较,10-4、10-3、10-2mol/LKI组和10-3mol/LH2O2组WT、MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠甲状腺细胞活力[(73.63±2.05)%、(72.41±2.26)%、(69.63±2.29)%、(44.90±2.93)%和(65.40±2.39)%、(64,51±2.27)%、(61.48±2.33)%、(40.80±2.76)%]均显著下降(P均〈0.05),且MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠与WT小鼠相比,细胞活力下降更加明显(P均〈0.05)。与对照组[(1995.28±30.52)、(2004.96±19.71)U/L]比较,10-4、10-3、10-2mol/LKI组和10-3mol/LH2O2组WT和MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠甲状腺细胞培养液中LDH含量[(2809.22±156.53)、(2850.80±137.83)、(2920.45±152.92)、(4487.49±130.67)U/L和(3261.06±120.44)、(3474.19±142.15)、(3597.08±150.86)、(4706.64±148.57)U/L]均显著升高(P均〈0.05),且MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠与WT小鼠相比,LDH含量升高更加明显(P均〈0.05)。与对照组(26.49±7.66、37.11±8.48)比较,10-2mol/LKI组和100mol/LH202组WT、MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠甲状腺细胞线粒体超氧化物生成(58.96±5.1l、87.95±4.25和71.21±5.55、99.76±4.42)明显增加(P均〈0.05);且MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠与WT小鼠相比,线粒体超氧化物生成增加更加明显(P均〈0.05)。结论高碘(10-2mol/L)和10-3mol/LH2O2可诱导WT和MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠甲状腺细胞线粒体超氧化物生成增多,细胞活力下降.LDH分泌增加:MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠较WT小鼠甲状腺线粒体超氧化物生成增加更明显。提示MT-Ⅰ/Ⅱ在对抗氧化应激方面具有一定作用。

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