肠出血性大肠埃希菌O157：H7外膜蛋白A的表达、鉴定和纯化

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rockegg2009

【摘要】

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目的构建肠出血性大肠埃希菌O157：H7外膜蛋白A基因重组质粒，研究其在大肠埃希菌中的表达情况。方法用RT-PCR法从肠出血性大肠埃希菌O157：H7菌株克隆OmpA基因，构建重组质粒pET-30a

【作者】

：

刘岚兰英华李用国

【机构】

：

哈尔滨医科大学附属第一医院感染科

【出处】

：

中国病原生物学杂志

【发表日期】

：

2008年7期

【关键词】

：

肠出血性大肠埃希菌O157:H7 外膜蛋白A 重组质粒原核表达 Enterohaemorrhagic Escherichia coli （EHEC） O157

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目的构建肠出血性大肠埃希菌O157：H7外膜蛋白A基因重组质粒，研究其在大肠埃希菌中的表达情况。方法用RT-PCR法从肠出血性大肠埃希菌O157：H7菌株克隆OmpA基因，构建重组质粒pET-30a（＋）-OmpA，经双酶切及基因测序鉴定后在E．coliBL21（DE3）原核表达系统中诱导OmpA的表达，通过蛋白质电泳技术检测蛋白的表达，用Western blot法测定和分析免疫反应性。结果获得的目的基因为1041bp，与预期值相符，测序结果与GenBank公布序列的同源性达100％，重组质粒pET-30

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