小鼠AMCase基因突变体的cDNA克隆及序列分析

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目的 克隆小鼠酸性哺乳动物几丁质酶(AMCase),并进行序列分析。方法 从BALB/c小鼠胃组织中提取总RNA,逆转录成cDNA,运用PCR技术体外扩增获得AMCase基因,构建pMD18T/AMCase重组载体,测序后应用DNAMAN4.0软件与标准序列进行比较,并通过SignalP 3.0和TMHMM Serverv.2.0等服务器对等电点、氨基酸组成、信号肽和跨膜结构等特征进行分析。结果 所克隆基因共编码473个氨基酸,分子量为51.93kD。等电点为4.73。与AMCase同源性达99.57%,
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