人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体的构建及表达

来源 :南华大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenjun7575

【摘要】

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目的构建在哺乳动物细胞中表达的人乳头瘤病毒16型早期蛋白6真核表达载体pcDNA3．1（-），E6，为研究HPV16 E6蛋白在细胞永生化作用中的机制奠定实验基础。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增E6

【作者】

：

蒋永林王静王鑫余敏君万艳平

【机构】

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南华大学医学院病原生物学研究所

【出处】

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南华大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

人乳头瘤病毒16型早期蛋白6 真核表达 human papillomavirus type 16 E6 protein eukaryotic expres

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目的构建在哺乳动物细胞中表达的人乳头瘤病毒16型早期蛋白6真核表达载体pcDNA3．1（-），E6，为研究HPV16 E6蛋白在细胞永生化作用中的机制奠定实验基础。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增E6基因。将PCR产物纯化后与pUCm-T载体连接，经蓝白斑筛选、双酶切鉴定及序列分析后，亚克隆至pcDNA3．1（-）真核表达载体中；阳性克隆经双酶切鉴定后转染RAW264．7巨噬细胞，Western blotting鉴定其在RAW264，7细胞中的表达。结果重组载体经酶切、PCR及测序证明插入片断序列正确无误

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