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目的
探究R脊椎蛋白1（RSPO1）在成骨分化中的作用及机制。
方法利用xCELLigence系统研究RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力的影响。通过磷酸酶检测试剂盒检测ALP活性，ELISA法检测护骨因子的表达，通过双荧光素酶报告基因检测系统，利用TOPflash T细胞因子（TCF）报告质粒检测Wnt/β-联蛋白（β-catenin）信号通路活性。利用蛋白印迹法检测β-catenin蛋白累积情况。采用t检验进行统计学分析。
结果RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力无影响。RSPO1单独处理上调ALP活力（2.85±0.08和1.74±0.21，t=3.014，P<0.05）及护骨因子表达能力（1.29±0.13和1.0±0.21，t=3.348，P<0.05）较弱，而RSPO1及Wnt3A协同处理可显著增强ALP活力（81.37±5.08和1.74±0.21，t=31.31，P<0.01）并上调护骨因子表达（5.26±0.60和1.00±0.21，t=6.99，P<0.01）。RSPO1协同Wnt3A激活TCF活性并诱导β-catenin蛋白积累（3.28±0.18和1.00±0.21，t=10.94，P<0.05）。但是，单独RSPO1对TCF的活性及β-catenin积累无影响（1.25±0.08和1.0±0.21，t=2.225，P>0.05）。
结论RSPO1可协同Wnt3A激活Wnt/β-catenin信号通路，诱导细胞成骨分化，提示RSPO1有望应用于RA的治疗。