目的建立反相高效液相色谱法测定三妙丸中黄柏生物碱微透析探针体内外回收率,考察回收率影响因素及体内稳定性。方法采用增量法和减量法,用RP-HPLC法测定微透析样品中药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度,考察流速及质量浓度对探针回收率的影响;探针分别植入颈静脉和膝关节,考察生物碱体内回收率稳定性。结果药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度在0.04~1.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=7),本方法的专属性、精密度、准确度和稳定性等均符合微透析样品的分析要求。膝关节探针以1.0μL·min-1灌流,药根碱、巴马汀和小檗碱的相对回收率(RR)和损失率(RL)分别为(29.38±2.02)%和(31.80±1.88)%、(30.48±1.93)%和(30.93±2.09)%及(28.95±0.94)%和(30.53±1.74)%。在质量浓度为0.20~0.80 mg·L-1内,RR和RL一致,探针回收率与流速成反比,与质量浓度无关。体内回收率在5 h内保持稳定。结论反透析法校正大鼠血和膝关节的回收率时,所用的微透析方法可用于三妙丸中黄柏生物碱体内药动学研究。