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【摘 要】 目的：建立痔炎消胶囊中芍药苷的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定芍药苷的含量。结果：芍药苷的线性范围为Y=4.2873X+35.5210，r=0.9998线性关系良好；平均加样回收率94.5%。结论：方法操作简单，重复性好，为评价和监控痔炎消胶囊的质量提供可靠的方法。
【关键词】 痔炎消胶囊 芍药苷 HPLC
【中图分类号】 R284.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）06-0332-01
痔炎消胶囊是马应龙药业集团股份有限公司生产的纯中药制剂，其成分主要有火麻仁、紫珠叶、槐花、金银花、地榆、白芍、三七、茅根、茵陈、枳壳十味组成，具有清热解毒，润肠通便的功效。主要用于痔疮发炎止痛的治疗。本品为传统中药制剂，其标准缺少对芍药的定量测定，不能全面的评估药品的质量。芍药具有抗炎和免疫调节等的药理作用，本实验以制剂中的芍药作为研究对象，采用高效液相色谱法测定芍药中芍药苷的含量。
1 仪器与试药
WATERS-515高效液相色谱仪，WATERS 2998 Photodiode Array Detector检测器组成。对照品芍药苷（110736-201337，购自中国药品生物制品检定所）；痔炎消胶囊（马应龙药业集团股份有限公司，批号为130301、130402，131202），乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件系统及系统适用性实验
色谱柱：DIKMA （Diamosil C18，5μm 250×4.6mm）；流动相：乙腈-水（20：80）；流速1.0mL？min-1.在上述色谱条件下，理论板数按芍药苷记不得低于3000.
2.2 溶液的制备
2.2.1 對照品溶液。精密称芍药苷对照品0.04069g，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解，并稀释至刻度，精密量取1 ml，置100ml的容量瓶中，甲醇定容做为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液。取本品内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置100ml的容量瓶中，加入甲醇溶液超声处理25分钟，放冷定容至刻度，滤过，取续滤液即得。
2.3 方法学验证
2.3.1 专属性考察。对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测定，样品中主峰保留时间和对照品主峰保留时间一直，无干扰。
2.3.2 线性关系考察。分别精密量取浓度为C=0.4069mg/ml 的对照品储备溶液1μl，5μl，10μl，15μl，20μl，25μl注入液相色谱仪中，测定峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，回归方程为：Y=4.2873X+32.5210，r=0.9998.由测定结果表明，芍药苷对照品进样量在范围内线性关系良好。
2.3.3 精密度实验。精密吸取对照品溶液10μl，连续进样6次，测定色谱峰面积，以峰面积进行计算RSD为0.11%。表明仪器精密度良好。
2.3.4 稳定性实验。取本品（批号为），精密称取0.5g，按“2.2.2”项下制备供试品，精密量取10μl，按0，2，4，6，8，10，24小时间隔进样，测定色谱峰面积RSD为0.21%，表明供试品溶液待测成分在室温放置24小时内基本稳定。
2.3.5 重复性实验。取本品（批号），精密量取0.2g，共6份，分别按2.2.2项下方法制备供试品溶液。精密吸取10μl，测定色谱峰面积，计算含量，含量的平均值RSD为2.0%。表明其重复性良好。
2.3.6 回收率实验。取已知含量的本品（批号为131202，芍药苷含量为8.75 mg·g-1，取对照品0.5g， 精密称定，共6份，分别精密加入芍药苷对照品（C=1.0021mg/ml），超声处理25分钟。按2.2.2项下制备供试品溶液。精密量取10微升，注入液相色谱仪，测定色谱峰面积，计算回收率，即得。芍药苷的回收率在91.30%-99.20%之间，均值为94.5%，RSD为2.0%，符合有关规定。
2.4 样品测定
采用“2.2.2”项下方法，测定3批样品中芍药苷的含量，测定结果见表1.
表1 3批样品芍药苷含量测定结果（mg·g-1）
3 讨论
3.1 检测波长的选择
取芍药苷对照品，在200-400nm之间进行扫描，结果在230nm有最大吸收，所以本实验选定检测波长为230nm.
3.2 流动相的选择
本实验采用不同比例的乙腈-水，甲醇-0.1%磷酸水溶液，甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液[1-3]，进行比较，结果发现甲醇-水溶液洗脱时，色谱峰形良好，理论塔板数过3000.
3.3 本品是颗粒剂，采用不同比例的甲醇水溶液提取主要成分，发现甲醇超声提取含量最高，所以选择甲醇作为提取溶剂，方法简单可行.
3.4 小节
本品是中药成方制剂，但质量标准缺少对芍药苷的定量测定，未能有效的控制本制剂的质量，本方法样品处理简便，方法准确，可为该制剂定新的检测方法与质量标准提供参考价值.
参考文献
[1]中国药典2010年版；96-97；147-148；419-420
[2]贾传弟；高效液相色谱法测定败酱草片中芍药苷的含量测定；中医药临床杂志；2010年04期
[3]刘睿高效液相色谱法测定乌芍散中芍药苷的含量；时珍国医国药2004年12期
【关键词】 痔炎消胶囊 芍药苷 HPLC
【中图分类号】 R284.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）06-0332-01
痔炎消胶囊是马应龙药业集团股份有限公司生产的纯中药制剂，其成分主要有火麻仁、紫珠叶、槐花、金银花、地榆、白芍、三七、茅根、茵陈、枳壳十味组成，具有清热解毒，润肠通便的功效。主要用于痔疮发炎止痛的治疗。本品为传统中药制剂，其标准缺少对芍药的定量测定，不能全面的评估药品的质量。芍药具有抗炎和免疫调节等的药理作用，本实验以制剂中的芍药作为研究对象，采用高效液相色谱法测定芍药中芍药苷的含量。
1 仪器与试药
WATERS-515高效液相色谱仪，WATERS 2998 Photodiode Array Detector检测器组成。对照品芍药苷（110736-201337，购自中国药品生物制品检定所）；痔炎消胶囊（马应龙药业集团股份有限公司，批号为130301、130402，131202），乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件系统及系统适用性实验
色谱柱：DIKMA （Diamosil C18，5μm 250×4.6mm）；流动相：乙腈-水（20：80）；流速1.0mL？min-1.在上述色谱条件下，理论板数按芍药苷记不得低于3000.
2.2 溶液的制备
2.2.1 對照品溶液。精密称芍药苷对照品0.04069g，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解，并稀释至刻度，精密量取1 ml，置100ml的容量瓶中，甲醇定容做为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液。取本品内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置100ml的容量瓶中，加入甲醇溶液超声处理25分钟，放冷定容至刻度，滤过，取续滤液即得。
2.3 方法学验证
2.3.1 专属性考察。对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测定，样品中主峰保留时间和对照品主峰保留时间一直，无干扰。
2.3.2 线性关系考察。分别精密量取浓度为C=0.4069mg/ml 的对照品储备溶液1μl，5μl，10μl，15μl，20μl，25μl注入液相色谱仪中，测定峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，回归方程为：Y=4.2873X+32.5210，r=0.9998.由测定结果表明，芍药苷对照品进样量在范围内线性关系良好。
2.3.3 精密度实验。精密吸取对照品溶液10μl，连续进样6次，测定色谱峰面积，以峰面积进行计算RSD为0.11%。表明仪器精密度良好。
2.3.4 稳定性实验。取本品（批号为），精密称取0.5g，按“2.2.2”项下制备供试品，精密量取10μl，按0，2，4，6，8，10，24小时间隔进样，测定色谱峰面积RSD为0.21%，表明供试品溶液待测成分在室温放置24小时内基本稳定。
2.3.5 重复性实验。取本品（批号），精密量取0.2g，共6份，分别按2.2.2项下方法制备供试品溶液。精密吸取10μl，测定色谱峰面积，计算含量，含量的平均值RSD为2.0%。表明其重复性良好。
2.3.6 回收率实验。取已知含量的本品（批号为131202，芍药苷含量为8.75 mg·g-1，取对照品0.5g， 精密称定，共6份，分别精密加入芍药苷对照品（C=1.0021mg/ml），超声处理25分钟。按2.2.2项下制备供试品溶液。精密量取10微升，注入液相色谱仪，测定色谱峰面积，计算回收率，即得。芍药苷的回收率在91.30%-99.20%之间，均值为94.5%，RSD为2.0%，符合有关规定。
2.4 样品测定
采用“2.2.2”项下方法，测定3批样品中芍药苷的含量，测定结果见表1.
表1 3批样品芍药苷含量测定结果（mg·g-1）
3 讨论
3.1 检测波长的选择
取芍药苷对照品，在200-400nm之间进行扫描，结果在230nm有最大吸收，所以本实验选定检测波长为230nm.
3.2 流动相的选择
本实验采用不同比例的乙腈-水，甲醇-0.1%磷酸水溶液，甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液[1-3]，进行比较，结果发现甲醇-水溶液洗脱时，色谱峰形良好，理论塔板数过3000.
3.3 本品是颗粒剂，采用不同比例的甲醇水溶液提取主要成分，发现甲醇超声提取含量最高，所以选择甲醇作为提取溶剂，方法简单可行.
3.4 小节
本品是中药成方制剂，但质量标准缺少对芍药苷的定量测定，未能有效的控制本制剂的质量，本方法样品处理简便，方法准确，可为该制剂定新的检测方法与质量标准提供参考价值.
参考文献
[1]中国药典2010年版；96-97；147-148；419-420
[2]贾传弟；高效液相色谱法测定败酱草片中芍药苷的含量测定；中医药临床杂志；2010年04期
[3]刘睿高效液相色谱法测定乌芍散中芍药苷的含量；时珍国医国药2004年12期