流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ctrl111shift

【摘要】

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【作者】

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刘明于康震张云孔宪刚徐宜为

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所　兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所　兽医生

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2000年S1期

【关键词】

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流感病毒血凝素基因杆状病毒表达 influenza virus haemagglutinin gene baculovirus expression

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应用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增了禽流感病毒Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／１／９６（Ｈ５Ｎ１）１．７ｋｂ的ＨＡ基因，将其克隆到ｐＵＣ１９的ＢａｍＨＩ位点，筛选到阳性重组子ｐＵＣＨ５。然后将ＨＡ基因亚克隆到杆状病毒转移载体ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓＢ，筛选到重组转移载体ｐＢａｃＨ５。经过序列分析证明阅读框架正确后，在脂质体转染试剂介导下，ｐＢａｃＨ５与线性化的杆状病毒ＤＮＡ（Ｂａｃ－Ｎ－ＢｌｕｅＤＮＡ）共转染Ｓｆ９昆虫细胞。重组杆状病毒经三轮蚀斑纯化，获得纯化的重组杆状病毒ｒＢａｃＨ５。提取重组杆状病毒

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