【摘 要】
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旨在克隆大鼠FcγRIIb基因,构建s FcγRIIb原核表达体系,制备重组大鼠s FcγRIIb蛋白。采用RT-PCR技术从RBL-2H3细胞中克隆FcγRIIb胞外区基因,构建重组表达质粒转化大肠杆菌
【机 构】
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河北大学科学技术处,河北大学药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81202338）, 河北省自然科学基金项目（H2013201128,H2016201121）, 河北省教育厅项目（Z2015013）
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旨在克隆大鼠FcγRIIb基因,构建s FcγRIIb原核表达体系,制备重组大鼠s FcγRIIb蛋白。采用RT-PCR技术从RBL-2H3细胞中克隆FcγRIIb胞外区基因,构建重组表达质粒转化大肠杆菌诱导表达,镍柱亲和层析纯化重组蛋白,复性后利用Western blotting、ELISA进行鉴定。结果显示,成功克隆大鼠s FcγRIIb基因,构建原核表达载体s FcγRIIb-p ET17b,转化大肠杆菌BL21（DE3）。通过对表达体系进行优化,确定IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导时间为4
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