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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7 RNA多聚酶(T7 RNA polymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断.将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM-T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因.将T7pol基因亚克隆入pET-28b(+)中,构建得到原核表达质粒pET28T7.该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98 800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致.将该质粒转化DH5α、JM109、H