【摘 要】
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目的探讨骨髓来源的人间叶干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)生物学特性.方法利用Percoll梯度离心分离骨髓单个核细胞,将之接种于含10%已筛选胎牛血清的低糖DMEM培养基中
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目的探讨骨髓来源的人间叶干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)生物学特性.方法利用Percoll梯度离心分离骨髓单个核细胞,将之接种于含10%已筛选胎牛血清的低糖DMEM培养基中.台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态,MTT实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响.应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征.同时观察了MSCs细胞组织化学特点.结果作者建立了一种简单的从骨髓中分离纯化及培养扩增MSCs的方法.MSCs具有独特的表征,即CD29,CD44及CD166阳性,CD34,CD45,HLA-DR和荆豆素阴性.细胞化学结果显示,几乎所有细胞酸性(萘酚醋酸酯酶(ANAE)及糖原(PAS反应)阳性,酸性磷酸酶(ACP)及苏丹黑反应(SB)阴性,而少数细胞碱性磷酸酶(ALP)阳性.细胞倍增时间约为30小时,细胞周期分析显示约10%细胞处于S期.MTT结果表明,MSCs对多种细胞因子的增殖反应性不同,TNF-α, IFN-γ, 干细胞因子 (SCF)及胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)明显促进细胞的增殖,所试其它因子对细胞生长影响不大.结论 MSCs是一群均一的细胞,具有独特的增殖、表征及组织化学特征.MSCs对细胞因子的不同反应性,为筛选合适的细胞体外扩增及维持体系提供了有意义的线索,同时也将加深人们对MSCs生物学特性的了解.
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