研究了铁氰化钾存在下,4-氨基安替比林与硫酸特步他林相互作用所引起吸收光谱的变化,建立了简便、快速测定药物中硫酸特步他林的新的分光光度法。在碱性介质中,铁氰化钾氧化硫酸特步他林的生成物可与4-氨基安替比林发生缩合反应,生成紫红色4-氨基安替比林衍生物,摩尔比为1:2,表观摩尔吸收系数和稳定常数分别为2.27×10⁴L·mol^-1·cm^-1和2.80×10⁹。测定体系最大吸收波长556 nm处的吸光度,可测定硫酸特步他林的含量,并探讨其反应机理。硫酸特步他林的浓度在0.256¹9.2μg·mL^-1范围内与体系的吸光度呈良好的线性关系,其线性回归方程为A=0.0059+0.04138 c(μg·mL^-1),线性相关系数r=0.9999。方法的检出限和精密度的相对标准偏差分别为0.15μg·mL^-1和1.4%。将方法应用于硫酸特步他林片中硫酸特步他林含量的测定,加标后平均回收率在97.5%以上。