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背景:造血生长因子可分别作用于不同的造血细胞和细胞的不同分化阶段。红细胞生成素可促进晚期红系祖细胞的增殖分化,白细胞介素3为多潜能集落刺激因子,对多种造血细胞的分化成熟具有促进作用。目的:观察细胞因子的不同组合及人参总皂苷对CD34+细胞体外定向诱导分化为红系血细胞的影响。设计:观察对比实验。单位:重庆医科大学。材料:实验于2002-07/2004-01在重庆医科大学组织胚胎学教研室、基础医学研究所、重庆市生物化学与分子药理学重点实验室完成。正常人骨髓细胞来自第三军医大学大坪医院胸外科无血液系统疾病患者手术摘除的肋骨,所有患者知情同意。人参总皂苷和试剂由重庆中药研究所惠赠。胎牛血清、FITCCD34+抗体、FITC标记同型对照小鼠IgG1为BectonDickinson公司产品,CD71+抗体为SantaCruz公司产品,血小板生成素、Flt-3配基、干细胞因子、白细胞介素-3为SantaCruz公司产品,红细胞生成素为Amgen公司。方法:应用阴性分选策略,以StemsepTM系统从正常人骨髓细胞中分离CD34+造血干/祖细胞。经造血细胞因子不同组合(白细胞介素3+红细胞生成素、干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素、Flt-3配基+血小板生成素+干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素)进行液体培养,并以干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素为对照组,在其中加入终浓度分别为10,20,50,70,100mg/L人参总皂苷为加药组,检测细胞总数、CD71+细胞比例;在CD34+细胞培养体系中加入不同剂量的人参总皂苷(剂量同前)为药物组,以不加人参总皂苷为对照组,通过甲基纤维素半固体培养法检测人参总皂苷诱导CD34+造血干/祖细胞向红系祖细胞(早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞)增殖与分化能力。主要观察指标:①不同的细胞因子组CD34+细胞体外增殖情况。②人参总皂苷对CD34+细胞定向诱导分化为红系血细胞的影响。③人参总皂苷对CD34+细胞形成红系祖细胞能力的影响。结果:①各因子组合中以Flt-3配基+血小板生成素+干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素细胞因子组合诱导CD34+细胞分化为红系血细胞的能力最强,2周时CD71+细胞比例为(61.20±5.31)%。②人参总皂苷20mg/L是液体培养诱导CD34+细胞向红系分化的最佳浓度,与干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素协同作用CD34+细胞2周后,CD71+细胞比例从(48.39±5.07)%增加到(56.20±1.40)%。③人参总皂苷10～50mg/L均能提高CD34+细胞形成早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞的集落产率。结论:含有Flt-3配基+血小板生成素+干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素的细胞因子组合,可诱导CD34+细胞定向生成大量的红系细胞;人参总皂苷能促进CD34+细胞定向诱导分化为红系血细胞。