【摘 要】
:
目的表达和纯化乙型脑炎病毒Pr M基因的融合蛋白,制备Pr M融合蛋白的鼠源性单克隆抗体(p Ab)。方法根据Gen Bank数据库中乙型脑炎病毒Pr M氨基酸序列获得其对应的基因序列,对
【机 构】
:
湖南省人民医院检验科,湖南省疾病预防控制中心
论文部分内容阅读
目的表达和纯化乙型脑炎病毒Pr M基因的融合蛋白,制备Pr M融合蛋白的鼠源性单克隆抗体(p Ab)。方法根据Gen Bank数据库中乙型脑炎病毒Pr M氨基酸序列获得其对应的基因序列,对Pr M全长基因(80 aa)进行体外合成,将其克隆至p ET-21原核表达载体,构建重组表达质粒p ET21-Pr M;将阳性重组质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白,通过镍离子亲和层析纯化目的蛋白;纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,获取单克隆抗体并利用Protein A Sepharose柱进行纯化,ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性。结果成功构建了p ET-21-Pr M原核表达载体,0.5 mmol/L PTG 30℃培养6 h,原核蛋白Pr M蛋白以包涵体形式在大肠杆菌得到高水平表达,通过复性与亲和层析获得纯度在90%以上的Pr M蛋白,蛋白浓度为600 mg/L,制备的抗Pr M单抗效价高达1:1.6×106,Western blot鉴定其具有良好的特异性。结论获得高纯度乙型脑炎病毒Pr M蛋白,并制备特异性单克隆抗体,将为进一步研究乙型脑炎病毒的生物学功能提供实验基础。
其他文献
<正>国办函[2015]132号江苏省人民政府:你省关于报请审批扬州市城市总体规划的请示收悉。经国务院批准,现通知如下:一、国务院原则同意《扬州市城市总体规划(2011—2020年)》
物流托盘共用服务供应链系统作为一种新兴的现代物流服务模式,对于提高物流效率、节约资源具有重要的现实意义。本文建立的托盘共用系统及其优化管理策略,主要包括业务服务、电
近年来,广西贫困地区尤其是少数民族地区频繁的山地村寨大火给人民群众的生命财产带来巨大的损失,严重影响农村经济的发展和社会稳定,引起了社会的广泛关注,村寨防火改造亟需
<正>美术鉴赏对高中学生形成美术鉴赏能力,提高审美素养具有主导性和基础性的作用,在整个高中美术课程中占极其重要的地位。作为人教版高中《美术鉴赏》教材的责任编辑,笔者
为了实现到2020年现有标准下贫困人口摆脱贫困这一宏伟目标,国家能源局和国务院扶贫开发领导工作小组办公室于2014年10月印发了《关于实施光伏扶贫工程工作方案》,计划用6年时
目的:探讨情景模拟教学在急救护理技能考核中的效果.方法:将研究对象分为两个组,在同一标准下进行考核,观察组采用情景模拟的考核方式,对照组采用传统一对一的考核方式.最后进行成绩
本文阐述了电磁兼容性研究的意义,介绍了家用电器中存在的电磁干扰;重点介绍了电容式触摸屏在家用电器中使用过程中存在的电容干扰问题及其解决办法。
以信息化为核心的第三次工业革命正在对人类社会发生着巨大影响。随着全球数字化革命加速,以信息技术为支撑、以PC和智能手机为工具、以移动后勤或掌上后勤为主要形式的高校
本文从认清自身工作特点、增强管理针对性,努力培养三种能力、增强管理有效性,把握教育发展趋势、增强管理预见性等三个方面,初步论述了确立新时期高校办公室管理着眼点的思