【摘 要】
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目的:通过基因芯片等方法寻找血流限制诱导肌肥大组织表达变化的基因,探讨其原因和分子机制.方法:2019年9月～2019年11月,选用SPF级健康SD大鼠8只,适应性喂养1周后,称重,采用自
【机 构】
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湘南学院康复学院,湖南郴州423000;湘南学院康复学院,湖南郴州423000;日本顺天堂大学医学部运动器医学科,日本东京113-8421;浙江中医药大学附属第三医院康复医学科,浙江杭州310005
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目的:通过基因芯片等方法寻找血流限制诱导肌肥大组织表达变化的基因,探讨其原因和分子机制.方法:2019年9月～2019年11月,选用SPF级健康SD大鼠8只,适应性喂养1周后,称重,采用自身左右后肢对照.所有大鼠按剂量30mg/kg体重戊巴比妥钠麻醉后在右后肢膝盖上方近股关节处橡皮带束缚血流限制,计时30min,血流限制每周2次,共4次.动物处理后正常饲养和活动.造模完成后取出双侧下肢比目鱼肌作为样本,用DEPC水漂洗后投入液氮中保存,抽提大鼠肌肉组织mRNA,经反转录获取大鼠比目鱼肌组织cDNA探针,进行基因芯片检测.检测结果经荧光定量聚合酶链反应(PCR)验证.结果:与对照组大鼠的比目鱼肌组织相比,实验组比目鱼肌组织的8条差异表达基因,其中6条显著上调基因(Chrna1、Cacnb1、Pla2g2a、Stap2、Hspbap1和Trib3)和2条显著下降基因(Ipo5和Smc4).在8条基因中6条(75％)为已知基因,已在GeneBank中登录;2条(25％)基因为未知基因.已知基因中6条全部表达上调,下调表达基因全部为未知基因.RT-PCR验证结果与基因芯片检测结果相符.结论:血流限制诱导骨骼肌肥大的发生发展是多种因素、多条途径相互作用的结果.实验结果提示所有差异表达基因中的上升和下降基因,主要涉及肌纤维蛋白合成与收缩相关介质和通道有关;差异表达基因中还有很多未知基因,许多相关的未知领域有待研究.
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