目的:对SRH融合蛋白工程菌发酵表达的影响因素进行研究和分析,并建立适宜的SRH融合蛋白工程菌发酵工艺。方法:优化SRH发酵过程中的诱导时机、诱导温度、诱导时间、溶氧调控和pH值,建立SRH融合蛋白工程菌发酵工艺,采用SDS-PAGE电泳对其表达情况进行分析;纯化目的蛋白,方法为凝胶过滤层析和离子交换,检测纯化后目的蛋白的抗凝活性和溶栓活性。结果:优化后发酵条件如下:溶氧为45%,发酵pH为7.0,菌体浓度为OD600=8时开始诱导,诱导时间为4.5h,诱导温度为41℃。在此发酵条件下,细菌获得量为25g/L,SRH蛋白的表达量为45%,可溶性表达为90%;目的蛋白经过纯化后,纯度超过95%,100AU/mg和1.80×104 AU/mg分别为SRH的抗凝活性和蛋白溶栓活性。结论:建立了SRH融合蛋白工程菌发酵工艺,蛋白表达量在该发酵条件下具有较高值,发酵蛋白中含有少量的杂蛋白,大部分为可溶性表达,发酵产物具有生物学活性。