【摘 要】
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目的 结合或未结合生长因子的胶原补片经碳化二亚胺(EDC)法处理后,种植人骨髓基质干细胞,分别行大鼠心室成形术(SVR),比较处理后的胶原补片(PBS)对大鼠左心室构型的影响.方法
【机 构】
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150086,哈尔滨医科大学附属第二医院心血管外科
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目的 结合或未结合生长因子的胶原补片经碳化二亚胺(EDC)法处理后,种植人骨髓基质干细胞,分别行大鼠心室成形术(SVR),比较处理后的胶原补片(PBS)对大鼠左心室构型的影响.方法 按胶原补片处理情况分为4组,PBS组(单纯胶原补片)、EDC组(胶原补片经EDC处理)、GF组[胶原补片经EDC处理并结合血管内皮细胞生长因子+碱性成纤维细胞生长因子(VEGF+ bFGF),形成GF补片]、MSC+ GF组[体外培养人骨髓基质干细胞(hMSCs),取第3代细胞(P3)均匀种植于GF补片上(1×106/片),形成MSC+ GF补片].生物力学牵张仪测量PBS组、EDC组和GF组胶原补片的生物力学性能,扫描电镜检测各组补片的超微结构.成年雄性SD大鼠42只,体质量200～ 225 g,分别行左冠状动脉前降支结扎,制作大鼠室壁瘤模型.4周后,分别采用EDC补片、GF补片和MSC+ GF补片行SVR.术后第1、4周,超声心动图检测各组大鼠左心室形态、功能.处死大鼠取出心脏,球囊撑开左心室后固定距离摄片,Image J软件测量补片面积;固定切片,Masson染色,Image J软件测量补片厚度;SMA染色检测补片边缘新生小动脉密度.结果 与未经处理的胶原补片比较,EDC补片和GF补片的杨氏弹性模量和极限牵张力均明显增强,差异有统计学意义(P＜0.01);但补片孔径及孔隙率无明显改变.EDC补片、GF补片和MSC+ GF补片均可全层修补左心室室壁瘤,而未经处理的胶原补片无法承担此功能.修补4周后,与EDC组比较,MSC+ GF组和GF组的补片厚度更大、面积更小,新生小动脉密度大,差异均有统计学意义(P＜0.05).修补4周后,超声心动图结果示MSC+ GF组和GF组大鼠的左心室舒张末容积明显小于EDC组,差异均有统计学意义(P＜0.05);MSC+ GF组大鼠的左心室收缩末容积明显小于GF组和EDC组,射血分数明显优于GF组和EDC组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 经EDC法处理,共价结合VEGF+bFGF的胶原补片可更好地维持大鼠SVR术后的左心室形态.种植hMSCs有助于恢复和维持远期心脏功能.
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