环介导等温扩增快速检测人类嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型方法建立

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[目的]建立环介导等温扩增(LAMP)快速检测人类嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型方法。[方法]将HTLV-Ⅰ的PX基因转染pUC57构建HTLV-Ⅰ检测参考菌株,针对PX基因设计LAMP和PCR引物,用正交实验设计优化反应体系,并考察方法的特异性和灵敏度。[结果]25μlLAMP最佳反应体系为:外引物0.2μmol/L、内引物1.8μmol/L、dNTP2000μmol/L、Mg2+4mmol/L、甜菜碱0.4mol/L、BstDNA聚合酶8U;最佳反应条件为64℃恒温反应60min。[结论]LAMP方法具有灵敏、特异、操作简便、成本低廉的特点,可为HTLV-I的快速检测提供新手段。
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