【摘 要】
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目的设计能特异性切割人类瘢痕组织中TIMP -1 mRNA的核酶,构建其体外表达载体并大量制备核酶,以研究特异性阻断TIMP-1基因表达对瘢痕胶原降解的影响.方法根据Symons的“锤头
【机 构】
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第二军医大学长征医院整形科,中科院上海生化所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目 ( 39970 761) ;中科院院重大项目 (KJ95 1-B1-610 )
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目的设计能特异性切割人类瘢痕组织中TIMP -1 mRNA的核酶,构建其体外表达载体并大量制备核酶,以研究特异性阻断TIMP-1基因表达对瘢痕胶原降解的影响.方法根据Symons的“锤头结构”,以人TI MP-1的mRNA为靶RNA,设计核酶,以P 1.5为载体,制备TIMP-1特异性核酶的克隆,并通过转录制备大量核酶.结果针对第123,299和353位这三个位点设计了三个核酶,合成核酶基因后,构建了其表达载体并完成了克隆,通过体外转录证实克隆正确. 结论核酶体外表达载体的构建及克隆是研究核酶活性,抑制T
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