【摘 要】
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目的 研究c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)在小鼠T细胞增殖中的作用.方法 以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆
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目的 研究c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)在小鼠T细胞增殖中的作用.方法 以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析JNK的一种新的特异性抑制剂SP600125存不同剂量、不同时间对T细胞增殖的影响,并应用CellQuest软件分析增殖细胞各代所占比例和增殖指数(PI)及抑制指数(HI).采用碘化丙锭染色分析不同剂量SP600125对Con A或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激的小鼠T细胞周期变化的作用.结果 随着SP600125浓度从1.0μmol/L逐渐增至16.0 μmol/L,Con A对T细胞的促增殖作用逐渐减弱,以8.0～16.0 μmol/L的抑制作用最为明显,呈剂量依赖关系(r=0.98,P＜0.01);选择最佳剂量8.0 μmol/L,SP600125对T细胞增殖的抑制作用随时间从24 h递增至96 h而逐渐增强;进一步发现SP600125能使PDB加Ion刺激的小鼠T细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期和G2/M期,且阻止作用随上述浓度的增加而增强,呈明显剂量依赖关系(S期:r=-0.98,P＜0.01;G2/M期:r=-0.88,P＜0.05);SP600125也呈剂量依赖性地使ConA诱导的T细胞停滞于F0/G1期,阻止其进入S期(r=-0.90,P＜0.05).结论 JNK信号通路的活化在小鼠T细胞增殖中可能起着重要作用.
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