流式细胞术的亚G1峰法分析细胞凋亡的重新评价

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目的重新评价亚G1峰 (Sub G1)在细胞凋亡研究中的应用 ,解决应用中存在的问题。方法采用Sub G1法荧光参数线性放大和对数放大法对 3种具有不同细胞周期特异性的细胞凋亡模式进行检测分析。结果 3种不同周期特异性细胞凋亡模式在经培养 3、6h的对数放大法分析 ,Sub G1峰均出现在 10 2 荧光道数处 ,且 6h较 3h明显增高。荧光参数对数放大法可避免Sub G1法中Sub G1峰与碎片峰两峰重叠 ,当TdT法清楚地显示凋亡细胞在细胞周期中的时相位置时 ,PC缓冲液的应用则可避免Sub G1峰与G1期峰重叠。结论流式细胞术分析典型细胞凋亡时 ,Sub G1法作定量分析应与对数放大法同步进行 ,才能有效地避免碎片峰与Sub G1峰重叠 ,而PC缓冲液的应用则避免Sub G1峰与G1峰重叠 ,更有效分析细胞凋亡。Sub G1峰应为对称的“高氏分布”图形 ,而不应为“针”形的均一倍性峰。
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