论文部分内容阅读
[摘要]近年来，随着人们对清热解毒类中药的广泛关注，关于大青叶的化学成分、药理作用的研究日益深入，取得了一些积极的进展，但大青叶药理作用的物质基础仍然不清楚，并且缺乏真正反映其内在品质和药效的规范化质控标准，这些均影响了大青叶的推广应用。综述国内外近年来大青叶的化学成分、药理作用的研究进展，为大青叶的续研究与应用提供必要的参考。
[关键词]大青叶；靛蓝；靛玉红；药理作用
中图分类号：R931.5 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）07-0272-01
大青叶为十字花科植物菘蓝的干燥叶，其根称板蓝根。性味苦寒、以清热解毒、凉血化斑为主要功效，主治呼吸系统感染，主含靛玉烷B、靛蓝、靛玉红、色氨酸、色氨酮等其药理作用主要有抗病原微生物、抗内毒素、抗炎、增强免疫功能、解热等。现将近年来对大青叶的研究进展概述如下
1 化学成分
1．1 生物碱类
1．1．1 吲哚类生物碱
靛蓝（indigotin）、靛玉红（indirubin）、药典2005版以靛玉红作为大青叶药材的质量控制指标。
1．1．2 喹唑酮类生物碱
6一吲羟一吲哚并[2，1～b]喹唑啉酮一12（青黛酮，qingdainone）、4（3H）喹唑酮[4（3）-quinazoline-dione]、色胺酮（tryptanthrin）、3一（2一羧苯基）一4（3H）一喹唑酮[3一（2一carboxy—phenyl）一4（3H）一quinazolinone]。研究发现，4（3H）喹唑酮为大青叶抗病毒有效成分，可作为大青叶药材的一项质量控制指标。
1．2 有机酸类
水杨酸（salicylicacid）、邻氨基苯甲酸（anthran ilicacid）、丁香酸（syringicacid）、苯甲酸（ben—zoicacid）、棕榈酸（palmiticacid）、烟酸（nicotinicacid）、琥珀酸（succinicacid）。
1．3 苷类化合物
芸苔葡萄糖硫苷（glu—cobrassicin，芥苷）、新芸苔葡萄糖硫苷（neoglucobrassicin，新芥苷）、1一磺基芸苔葡萄糖硫苷（glucobrassicin一1一sulfonate，1一磺基芥苷）、腺苷、胞苷、尿苷、鸟苷。
1．4 无机元素
有锌、铁、钙、镁、锰、铜、钾、钠等无机元素。
1．5 其他
还含有（一）一落叶松脂素、（+）一异落叶松树脂醇、5一羟基一2一吲哚酮（5一hydroxy一2一mdolinone）、異牡荆素（isovitexin）、黄嘌呤、次黄嘌呤、β，γ一谷甾醇、多种氨基酸及挥发性成分。蓼大青叶中含有N一苯基一2一萘胺和虫漆蜡醇（1acero1）。
2 药理作用
2．1 抗甲型流感病毒作用
采用鸡胚法对不同种质的板蓝根（15种）和大青叶（15种）进行抗流感病毒检测，将不同种质的种子在相同环境中栽培，尽可能多地排除影响药材品质的因素，使结果较为可靠。结果：大多数板蓝根和大青叶样品对甲型流感病毒Al京防86一l株有明显的拮抗作用。无论是同病毒直接作用，还是治疗和预防作用均为有效。仅程度有所不同而已，直接作用普遍稍强于治疗和预防作用；不同种质的药材抗病毒活性的有无及强度存在差异，而且差异往几倍到几十倍之间，如此悬殊的差异无疑是疗效不确切的重要原因。从中也可以优化出抗病毒活性较强的物质。
2．2 抑菌作用
大量使用抗生素引起的细菌耐药性不断上升已成为全世界共同关注的难题之一，尤其是金黄色葡萄球菌的耐药率已达90％以中药因抑菌作用不同于抗生素，不易产生耐药而备受关注。用K—B纸片扩散法（100％大青叶浸出液滤纸片）对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行r研究，证实大青叶对以上各菌均有明显抑菌作用，尤其对金黄色葡萄球菌效果更明显。以不同方法逐级提取大青叶和板蓝根。获得总浸液、乙醇提取液、T醇萃取液，通过对实验菌（金黄色葡萄球菌、肠炎杆菌和大肠埃希菌）的药物敏感性试验。观察了各级提取物的抑菌作用，结果各级提取物均对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用，对肠炎杆闲和人肠埃希茼的抑菌作用随逐级提取而增强可见，大青叶和板蓝根均有广谱抗菌作用，对革氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌均有抑制作用，而且经过逐级提取工艺，使其药物活性逐渐富集，抑菌作用也增强
2.3 抗内毒素作用
以细菌内毒素俭盘法对异地栽培大青叶和原栽培品种进行抗内毒素作用评价，认为态环境改变后，大青叶仍能保持原栽培品种的品质，不同居群大青叶药材在药理作用方面的差异也不凶生态环境的趋同而丧失。大青叶这一类种质主导的药材，品种遗传基因对药材品质的形成起主要作用，环境饰变的作用较小。通过高效液相色谱法（HPLC法）对菘蓝根和根茎的氯仿提取液中靛蓝、靛玉红的含进行了精密测定，并运用鲎试剂法对靛监、靛玉红及板蓝根中分离得到的4种有机酸的抗内毒素活性进行丁比较。结果表明：植物菘蓝的根中不含靛玉红，根茎、叶柄、叶片中均含有靛蓝、靛玉红；靛蓝和靛玉红不具有抗内毒素活性，而板蓝根中分离得到的有机酸具有较强的抗内毒素活性。
2．4 免疫增强作用
研究大青叶水煎剂体外对C57小鼠免疫细胞分泌IL一2，TNF—α水平的影响，以H—TdR掺入法测定不同浓度大青叶水煎剂对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的毒性作用，以MTT方法分别检测IL-2，TNF-α的生物学活性。表明大青叶能促进ConA活化的T淋巴细胞分泌IL一2，辅助Tc细胞和B细胞的分化和增殖，在细胞免疫和体液免疫两方面调节免疫功能；但对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α水平无影响，提示大青叶在增强免疫的同时没有更多影响白细胞的活动，不造成更严重的病理损伤及功能失调。
2．5 抗肿瘤作用
大青叶具有抗肿瘤作用，对动物移植性肿瘤有较强的抑制作用，对慢性粒细胞血病有较好的疗效。研究发现大青叶很可能通过诱导MCF-7肺癌细胞中细胞色素P4501A1和1B1mRNA酶的活性，参与调节肺癌细胞的新陈代谢。
2．6 其他
抗炎作用：大青叶煎剂灌胃（ig）给药对小鼠甲醛性关节炎有明显抑制作用，可抑制二甲苯引起的兔局部皮肤炎症反应，降低毛细血管通透性。大青叶醇沉物与颗粒剂对二甲苯所致的小鼠耳肿胀及蛋清所致的大鼠足肿胀有明显的抑制作用，解热作用：大青叶煎剂对由霍乱、伤寒混合疫苗引起的发热兔有明显降低体温的作用，降温快、毒性小。大青叶醇沉物与颗粒剂对干酵母所致的大鼠发热及内毒素所致的家兔发热均有明显的降温作用。大青叶注射液对白介素一1β（IL一1β）诱导的新西兰兔发热有解热作用，且其解热作用机制可能与其抑制下丘脑前列腺素E3受体（EP3）mRNA的表达有关。大青叶还有一定的利胆作用，能促进胆汁排出并缓解疼痛。
3.结论与认识
大青叶化学成分复杂，目前其质量标准以靛玉红作为控制指标，而普遍认为中药材发挥疗效为化学成分组群，单一成分控制指标不能够全面反映大青叶的药材质量；大青叶药理活性研究较多，但目前还没有深入阐述其多种药理作用的物质基础，也难以建立反映大青叶药理活性本质的质量标准，因此，迫切需要继续筛选活性物质，拓展靶标明确的药理指标，建立科学合理的质量控制体系，为实现中药的现代化、标准化奠定基础，我们正在探索建立大青叶的指纹图谱，以期找到可以全面反映大青叶活性成分的质量控制方法，保证大青叶及其制剂的质量稳定可靠。
参考文献
[1]李微.大青叶的化学成分[J].沈阳药科大学学报，2005，22（1）.
[2]柳继锋.大青叶的化学成分研究[J].中国中药杂志，2006，31（23）.
[3]史国举.大青叶醇沉物药理作用的实验研究[J].河南中医学院报，2006.
[关键词]大青叶；靛蓝；靛玉红；药理作用
中图分类号：R931.5 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）07-0272-01
大青叶为十字花科植物菘蓝的干燥叶，其根称板蓝根。性味苦寒、以清热解毒、凉血化斑为主要功效，主治呼吸系统感染，主含靛玉烷B、靛蓝、靛玉红、色氨酸、色氨酮等其药理作用主要有抗病原微生物、抗内毒素、抗炎、增强免疫功能、解热等。现将近年来对大青叶的研究进展概述如下
1 化学成分
1．1 生物碱类
1．1．1 吲哚类生物碱
靛蓝（indigotin）、靛玉红（indirubin）、药典2005版以靛玉红作为大青叶药材的质量控制指标。
1．1．2 喹唑酮类生物碱
6一吲羟一吲哚并[2，1～b]喹唑啉酮一12（青黛酮，qingdainone）、4（3H）喹唑酮[4（3）-quinazoline-dione]、色胺酮（tryptanthrin）、3一（2一羧苯基）一4（3H）一喹唑酮[3一（2一carboxy—phenyl）一4（3H）一quinazolinone]。研究发现，4（3H）喹唑酮为大青叶抗病毒有效成分，可作为大青叶药材的一项质量控制指标。
1．2 有机酸类
水杨酸（salicylicacid）、邻氨基苯甲酸（anthran ilicacid）、丁香酸（syringicacid）、苯甲酸（ben—zoicacid）、棕榈酸（palmiticacid）、烟酸（nicotinicacid）、琥珀酸（succinicacid）。
1．3 苷类化合物
芸苔葡萄糖硫苷（glu—cobrassicin，芥苷）、新芸苔葡萄糖硫苷（neoglucobrassicin，新芥苷）、1一磺基芸苔葡萄糖硫苷（glucobrassicin一1一sulfonate，1一磺基芥苷）、腺苷、胞苷、尿苷、鸟苷。
1．4 无机元素
有锌、铁、钙、镁、锰、铜、钾、钠等无机元素。
1．5 其他
还含有（一）一落叶松脂素、（+）一异落叶松树脂醇、5一羟基一2一吲哚酮（5一hydroxy一2一mdolinone）、異牡荆素（isovitexin）、黄嘌呤、次黄嘌呤、β，γ一谷甾醇、多种氨基酸及挥发性成分。蓼大青叶中含有N一苯基一2一萘胺和虫漆蜡醇（1acero1）。
2 药理作用
2．1 抗甲型流感病毒作用
采用鸡胚法对不同种质的板蓝根（15种）和大青叶（15种）进行抗流感病毒检测，将不同种质的种子在相同环境中栽培，尽可能多地排除影响药材品质的因素，使结果较为可靠。结果：大多数板蓝根和大青叶样品对甲型流感病毒Al京防86一l株有明显的拮抗作用。无论是同病毒直接作用，还是治疗和预防作用均为有效。仅程度有所不同而已，直接作用普遍稍强于治疗和预防作用；不同种质的药材抗病毒活性的有无及强度存在差异，而且差异往几倍到几十倍之间，如此悬殊的差异无疑是疗效不确切的重要原因。从中也可以优化出抗病毒活性较强的物质。
2．2 抑菌作用
大量使用抗生素引起的细菌耐药性不断上升已成为全世界共同关注的难题之一，尤其是金黄色葡萄球菌的耐药率已达90％以中药因抑菌作用不同于抗生素，不易产生耐药而备受关注。用K—B纸片扩散法（100％大青叶浸出液滤纸片）对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行r研究，证实大青叶对以上各菌均有明显抑菌作用，尤其对金黄色葡萄球菌效果更明显。以不同方法逐级提取大青叶和板蓝根。获得总浸液、乙醇提取液、T醇萃取液，通过对实验菌（金黄色葡萄球菌、肠炎杆菌和大肠埃希菌）的药物敏感性试验。观察了各级提取物的抑菌作用，结果各级提取物均对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用，对肠炎杆闲和人肠埃希茼的抑菌作用随逐级提取而增强可见，大青叶和板蓝根均有广谱抗菌作用，对革氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌均有抑制作用，而且经过逐级提取工艺，使其药物活性逐渐富集，抑菌作用也增强
2.3 抗内毒素作用
以细菌内毒素俭盘法对异地栽培大青叶和原栽培品种进行抗内毒素作用评价，认为态环境改变后，大青叶仍能保持原栽培品种的品质，不同居群大青叶药材在药理作用方面的差异也不凶生态环境的趋同而丧失。大青叶这一类种质主导的药材，品种遗传基因对药材品质的形成起主要作用，环境饰变的作用较小。通过高效液相色谱法（HPLC法）对菘蓝根和根茎的氯仿提取液中靛蓝、靛玉红的含进行了精密测定，并运用鲎试剂法对靛监、靛玉红及板蓝根中分离得到的4种有机酸的抗内毒素活性进行丁比较。结果表明：植物菘蓝的根中不含靛玉红，根茎、叶柄、叶片中均含有靛蓝、靛玉红；靛蓝和靛玉红不具有抗内毒素活性，而板蓝根中分离得到的有机酸具有较强的抗内毒素活性。
2．4 免疫增强作用
研究大青叶水煎剂体外对C57小鼠免疫细胞分泌IL一2，TNF—α水平的影响，以H—TdR掺入法测定不同浓度大青叶水煎剂对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的毒性作用，以MTT方法分别检测IL-2，TNF-α的生物学活性。表明大青叶能促进ConA活化的T淋巴细胞分泌IL一2，辅助Tc细胞和B细胞的分化和增殖，在细胞免疫和体液免疫两方面调节免疫功能；但对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α水平无影响，提示大青叶在增强免疫的同时没有更多影响白细胞的活动，不造成更严重的病理损伤及功能失调。
2．5 抗肿瘤作用
大青叶具有抗肿瘤作用，对动物移植性肿瘤有较强的抑制作用，对慢性粒细胞血病有较好的疗效。研究发现大青叶很可能通过诱导MCF-7肺癌细胞中细胞色素P4501A1和1B1mRNA酶的活性，参与调节肺癌细胞的新陈代谢。
2．6 其他
抗炎作用：大青叶煎剂灌胃（ig）给药对小鼠甲醛性关节炎有明显抑制作用，可抑制二甲苯引起的兔局部皮肤炎症反应，降低毛细血管通透性。大青叶醇沉物与颗粒剂对二甲苯所致的小鼠耳肿胀及蛋清所致的大鼠足肿胀有明显的抑制作用，解热作用：大青叶煎剂对由霍乱、伤寒混合疫苗引起的发热兔有明显降低体温的作用，降温快、毒性小。大青叶醇沉物与颗粒剂对干酵母所致的大鼠发热及内毒素所致的家兔发热均有明显的降温作用。大青叶注射液对白介素一1β（IL一1β）诱导的新西兰兔发热有解热作用，且其解热作用机制可能与其抑制下丘脑前列腺素E3受体（EP3）mRNA的表达有关。大青叶还有一定的利胆作用，能促进胆汁排出并缓解疼痛。
3.结论与认识
大青叶化学成分复杂，目前其质量标准以靛玉红作为控制指标，而普遍认为中药材发挥疗效为化学成分组群，单一成分控制指标不能够全面反映大青叶的药材质量；大青叶药理活性研究较多，但目前还没有深入阐述其多种药理作用的物质基础，也难以建立反映大青叶药理活性本质的质量标准，因此，迫切需要继续筛选活性物质，拓展靶标明确的药理指标，建立科学合理的质量控制体系，为实现中药的现代化、标准化奠定基础，我们正在探索建立大青叶的指纹图谱，以期找到可以全面反映大青叶活性成分的质量控制方法，保证大青叶及其制剂的质量稳定可靠。
参考文献
[1]李微.大青叶的化学成分[J].沈阳药科大学学报，2005，22（1）.
[2]柳继锋.大青叶的化学成分研究[J].中国中药杂志，2006，31（23）.
[3]史国举.大青叶醇沉物药理作用的实验研究[J].河南中医学院报，2006.