研究高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein, HMGB1）对人脐静脉内皮细胞屏障通透性的影响，以及普通肝素对HMGB1介导的内皮细胞紧密连接蛋白Claudin-5下调的保护作用。
方法将经胰酶消化后的人脐静脉内皮细胞于培养瓶中传代培养，并分成4组：空白对照组（加入等量PBS）、rhHMGB1处理组（100 ng/mL）、普通肝素对照组（UFH 10 U/mL）、rhHMGB1+普通肝素处理组（100 ng/mL rhHMGB1 + UFH 10 U/mL）。传代培养后的人脐静脉内皮细胞，通过MTT法测定内皮细胞的存活率。Transwell法测定内皮细胞通透性；免疫荧光法对Claudin-5表达及分布进行测定；通过蛋白免疫印迹（Western blot）法检测Claudin-5蛋白表达。
结果用rhHMGB1（100 ng/mL）处理内皮细胞后，与空白对照组比较细胞活力无明显变化（P>0.05）；用rhHMGB1（100 ng/mL）分别处理内皮细胞3 h、6 h后，内皮细胞屏障通透性较空白对照组无明显变化（P>0.05）；而经rhHMGB1处理12 h、24 h后，与空白对照组相比，内皮细胞屏障通透性显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）。而普通肝素和rhHMGB1共同孵育内皮细胞12 h、24 h后，其内皮细胞屏障通透性均低于rhHMGB1处理组（P<0.05）。免疫荧光和Western-blot研究表明，rhHMGB1处理内皮细胞24 h后，细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5分布和表达降低；而经普通肝素和rhHMGB1共同孵育后，细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达提高，Claudin-5的荧光强度增强。
结论HMGB1可介导内皮细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的分布异常和表达下降，以及增加内皮细胞屏障的通透性；普通肝素可改善HMGB 1介导的内皮细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达和分布及内皮细胞屏障通透性。