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为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性 PRRSV 毒株(HP-PRRSV),根据 PRRSV 囊膜蛋白 GP2基因保守序列和 HP-PRRSV 特有的 Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法 RT-PCR 不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株 PRRSV 以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株 PRRSV 毒株并准确鉴别其中7株 HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对 PRRSV、HP-PRRSV 病毒液的检测低限均小于每个反应0.5 TCID50;其组内、组间检测变异系数均<10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光 RT-PCR 试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测 PRRSV 提供了一种新的分子生物学检测方法。