【摘 要】
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目的 检测肝癌细胞系中Yamanaka因子的表达,为肝癌细胞来源的诱导多能干细胞(iPS细胞)的建立和通过细胞重编程逆转肝癌的恶性表型提供实验依据.方法 通过反转录PCR检测Huh7、
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的 检测肝癌细胞系中Yamanaka因子的表达,为肝癌细胞来源的诱导多能干细胞(iPS细胞)的建立和通过细胞重编程逆转肝癌的恶性表型提供实验依据.方法 通过反转录PCR检测Huh7、SMMC-7721、HepG2等肝癌细胞系中4种Yamanaka因子Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc的mRNA水平,通过Western印迹方法检测上述因子在蛋白质水平的表达,并构建上述因子的慢病毒表达载体,在肝癌细胞中过表达上述转录因子.结果 4种Yamanaka因子在肝癌细胞系中均有不同程度表达,mRNA和蛋白质水平的检测结果一致.统计学分析显示,c-Myc的表达显著高于正常肝细胞.成功构建了Yamanaka因子的慢病毒表达载体,并诱导肝癌细胞呈现类似iPS细胞的形态.结论 Yamanaka因子在肝癌细胞中有不同程度的内源表达,而外源高表达外源Yamanaka因子对于iPS细胞的诱导至关重要.
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