【摘 要】
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目的:探讨miR-181a调控上皮-间充质转化(EMT)促进舌鳞状细胞癌细胞顺铂耐药的机制.方法:分别在CAL27/CDDP、CAL27中转染miR-181a mimics、miR-181a LNA,免疫印迹及免疫荧光检
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院 口腔科,广东广州,510120;中山大学光华口腔医学院 口腔颌面外科,广东广州,510055
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目的:探讨miR-181a调控上皮-间充质转化(EMT)促进舌鳞状细胞癌细胞顺铂耐药的机制.方法:分别在CAL27/CDDP、CAL27中转染miR-181a mimics、miR-181a LNA,免疫印迹及免疫荧光检测E-cadherin、Vimentin的表达;免疫印迹检测Twist1、Slug的表达;Transwell及划痕实验检测细胞的侵袭、迁移能力;MTT法检测细胞对顺铂的半抑制率.利用生物信息学方法预测Twist1可能为miR-181a的靶基因.构建包含Twist1结合序列片段的荧光素酶报告基因质粒,进行双荧光素酶报告基因实验.采用SPSS17.0软件包对结果进行单因素方差分析.结果:转染miR-181a mimics可逆转CAL27/CDDP的EMT表型,E-cadherin表达增强,Vimentin、Twist1及Slug表达降低,细胞的侵袭、迁移能力显著降低,IC50下降47.57%±6.23% (P<0.05).转染miR-181a LNA可诱导CAL27细胞发生EMT,Ecadherin表达降低,Vimentin、Twist1及Slug表达增强,细胞侵袭、迁移能力显著增强,IC50升高55.61%±7.20%(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实,Twist1是miR-181a的靶基因.结论:miR-181a靶向调控Twist1,从而抑制舌鳞癌细胞上皮-间充质转化与顺铂耐药.
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