【摘 要】
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目的 探讨激活蛋白-1 (AP-1)c-Jun与Fra1对类多巴胺能神经细胞存活能力的影响. 方法 (1)体外培养SH-SY5Y细胞,裂解后进行免疫共沉淀实验,检测c-Jun是否与Fra1形成二聚体.(2)
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目的 探讨激活蛋白-1 (AP-1)c-Jun与Fra1对类多巴胺能神经细胞存活能力的影响. 方法 (1)体外培养SH-SY5Y细胞,裂解后进行免疫共沉淀实验,检测c-Jun是否与Fra1形成二聚体.(2)将细胞分为4组,分别为对照组[加入二甲基亚砜(DMSO)]、SP600125组、U0126组及SP600125+U0126组[分别加入c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125、MEK1/2抑制剂U0126及SP600125+U0126].免疫印迹法检测c-Jun或Fra1表达,MTT法检测细胞活力.(3)用滴度为100MOI腺病毒(Ad)感染细胞,共分为4组,分别为对照组(转染绿色荧光蛋白)、Ad-c-Jun组、Ad-Fra1组、Ad-c-Jun+Ad-Fra1组(后3组分别转染相应Ad),免疫荧光染色检测感染率,MTT法检测细胞活力. 结果 (1)免疫共沉淀结果显示c-Jun和Fra1形成二聚体.(2)免疫印迹结果显示SP600125组c-Jun表达减少,U0126组Fra1表达减少.MTT结果显示,4组细胞活力差异有统计学意义(F=16.647,P=0.000),其中对照组与SP600125组、U0126组及SP600125+U0126组差异有统计学意义(P＜0.05).(3)过表达c-Jun、Fra1后,4组细胞活力差异有统计学意义(F=14.543,P=0.000),其中对照组与Ad-c-Jun组差异无统计学意义(P＞0.05),对照组与Ad-Fra1组差异有统计学意义(P＜0.05),Ad-Fra1组与Ad-c-Jun+Ad-Fra1组差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 c-Jun与Fra1形成二聚体促进类多巴胺能神经细胞存活.
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