【摘 要】
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目的 探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性.方法 选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患者精液标本(PR＜32％,PR+NP＜40％,精子密度≥15x 106/mL) 84例,正常精液标本(PR≥32％,PR+NP≥40％,精子密度≥15x106/mL)55例.通过精液计算机辅助分析系统(computer-aided sp
【机 构】
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400016 重庆,重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心;400016 重庆,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;400016 重庆,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实
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目的 探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性.方法 选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患者精液标本(PR＜32％,PR+NP＜40％,精子密度≥15x 106/mL) 84例,正常精液标本(PR≥32％,PR+NP≥40％,精子密度≥15x106/mL)55例.通过精液计算机辅助分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)检测精液常规参数及精子运动参数;不同浓度H2O2处理正常精子后通过CASA检测精子活力和运动参数变化,伊红染色检测精子存活率变化,Western blot检测精子SOD2和PRDX6表达变化;运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot同时对弱精症组精子和正常组精子SOD2和PRDX6表达进行定量检测,迸一步统计分析SOD2和PRDX6的表达变化及其与精液参数的相关性.结果 CASA检测结果显示精子活力在0.10、0.35、1.00 mmol/L H2O2处理后显著降低;精子运动参数中曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)、平均路径速率(VAP)和平均角位移(MAD)在0.05、0.10、0.35 mmol/L H2O2处理后剂量依赖式降低,侧摆幅度(ALH)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)和前向性(STR)在0.10、0.35 mmol/L H2O2处理后降低;伊红染色结果显示精子存活率在0.35、1.00 mmol/L H2O2处理后降低,而Western blot检测结果显示精子SOD2和PRDX6表达呈H2O2(0.10、0.35和1.00 mmol/L)剂量依赖式增高.RT-qPCR检测结果显示弱精症组精子SOD2[(0.297±0.038)vs(0.895±0.140),P＜0.01]与PRDX6[(0.743±0.107)vs(1.416±0.163),P＜0.01] mRNA相对表达量低于正常组.Western blot结果显示弱精症组精子SOD2[(0.689±0.147)vs(1.466±0.212),P＜0.01]与PRDX6[(0.726±0.084)vs(1.183±0.100),P＜0.01]蛋白相对表达量低于正常组.相关性分析结果显示精子SOD2 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.267,P＜0.01)和总活力(r=0.329,P＜0.01)呈正相关;PRDX6 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.453,P＜0.01)、总活力(r=0.476,P＜0.01)、STR(r=0.270,P＜0.01)、VCL(r=0.313,P＜0.01)、VSL(r=0.349,P＜0.01)、VAP(r=0.410,P＜0.01)呈正相关.结论 ROS可降低精子活力、运动能力和存活率并上调精子SOD2和PRDX6表达;弱精症患者精子SOD2和PRDX6表达下调且其表达与精子运动能力正相关.
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